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产地 | 进口 | 加工定制 | 是 |
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适用领域 | 科研 |
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
产品名称 | |
规格 | 48T/盒 |
编号 | FS-R2552 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人细胞裂解液 (阳性对照) 熊果苷Arbutin质量规格:≥98%,BR
兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2氯化血根碱(标准品)Sanguinarine chloride质量规格:HPLC≥98%,标准品
NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人细胞裂解液 (阳性对照) 亚麻木酚素(标准品)Secoisolariciresinol Diglucoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL氨基丙二酸Aminomalonic acid 质量规格:≥98%,BR
PK15-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)猪肾上皮细胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinAZD4547AZD-4547质量规格:>98%,FGFR抑制剂
人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1非达霉素Fidaxomicin质量规格:>98%,BR
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 比枯枯灵,右旋荷包牡丹碱(+)-Bicuculline质量规格:HPLC≥98%,BR
CL-0280HEL(人红白细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2比枯枯灵,右旋荷包牡丹碱(标准品)(+)-Bicuculline质量规格:HPLC≥98%,标准品
L1细胞,卵巢癌细胞 急性T细胞白血病细胞),Jurkat细胞 人皮肤黑色素瘤细胞;SK-MEL-1石杉碱甲(−)-Huperzine A质量规格:HPLC≥98%,BR
6T-CEM (人T细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2表没食子儿茶素EGC 质量规格:HPLC≥98%,BR
Promocell C-23020 Fibroblast Growth Medium 2, 成纤维细胞生长培养基2型(即用型) 500ml分子筛4A( beads,8-12 mesh)Molecular sieves, 4 Å质量规格:beads,8-12 mesh
黄胸鼠肺成纤维细胞;YCR分子筛, 5 Å(20-40目,气相、液相色谱柱)Molecular sieves, 5 Å质量规格:20-40目,气相、液相色谱柱
CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC))4,7-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole质量规格:>98.0%(GC)
人外周血白细胞*培养基 100mL2,7-二溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Dibromo-9,9-dimethylfluorene质量规格:>98.0%(HPLC)
Tca-8113细胞,人舌癌细胞 鼠伤寒沙门氏菌Ta102 正常大鼠肾细胞;NRK2,2'-二溴-9,9,-螺二[9H-芴](>95.0%(GC))2,2'-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]质量规格:>95.0%(GC)
新疆出血热病毒(XHFV)核酸检测试剂盒CM-R065大鼠肾上皮细胞*培养基100mL盐酸三氟拉嗪(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Trifluoperazine dihydrochloride
CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 人细胞裂解液 (阳性对照) 皮质甾酮/肾上腺酮质量规格:>97.0%Corticosterone
大鼠小胶质细胞RM前列地尔,前列腺素E1质量规格:>95%,BR,USP30Alprostadil,PGE1,
JEG-3细胞,人绒癌细胞 小鼠树突状细胞肉瘤细胞,DCS细胞 人冠状动脉内皮细胞HCAEC四烯雌酮,烯丙孕素质量规格:> 99%Altrenogest
HuT 78(人T淋巴细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2四烯雌酮,烯丙孕素(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Altrenogest
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
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