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产地 | 进口 | 加工定制 | 是 |
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适用领域 | 科研 |
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
产品名称 | |
规格 | 48T/盒 |
编号 | FS-R2533 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
胃癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml心钠素Ⅱ,大鼠,小鼠,兔Atriopeptin II (rat, rabbit,mouse)质量规格:>95%,BR
IZUMO4 Others Human 人 IZUMO4 / C19orf36 人细胞裂解液 (阳性对照) 心钠素Ⅲ,大鼠Atriopeptin III (rat)质量规格:>95%,BR
大鼠膀胱平滑肌细胞*培养基 100mL带3蛋白质(547-553),人Band 3 Protein (547-553)(human)质量规格:>95%,BR
NR8383大鼠肺泡巨噬细胞 Alveolar macrophages of NR8383 rats F12K培养基(SIGMA)+20%FBS带3蛋白质(824-829),人Band 3 Protein (824-829)(human)质量规格:>95%,BR
IGFBP2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP2 蛋白 (His 标签)碱性成纤维生长因子bFGF (119 - 126), BasicFibroblast Growth Factor,human, bovin质量规格:>95%,BR
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟米龙醋酸酯Fluorometholone Acetate质量规格:>97%
狗骨髓间质干细胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells十溴二苯醚Pentabromophenyl ether质量规格:>98%
HME7细胞,人黑色素瘤细胞 短双歧杆菌 EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-29氨基杂环盐酸盐3-Amino-3-azabicyclo[3.3.0]octane hydrochloride质量规格:>98%
UM-UC-3(人膀胱移行细胞癌) 5×106cells/瓶×2春雷霉素;春日霉素; 克死霉Kasugamycin质量规格:>60%,BR
HUVEC(HUV-EC-C) (人脐静脉血管内皮细胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌细胞 人癌细胞;MDA-MB-435S土拉霉素A,托拉菌素A,泰拉霉素Tulathromycin A质量规格:>95%
间充质干细胞成骨细胞分化生长添加物MODS杯[6]芳烃(>95.0%(HPLC))Calix[6]arene质量规格:>95.0%(HPLC)
IL13RA1 Others Rat 大鼠 IL13RA1 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-叔丁基杯[6]芳烃(含5-10%的苯)(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[6]arene (contains 5-10% Benzene)质量规格:>98.0%(HPLC)
人牙周膜成纤维细胞*培养基 100mL4-叔丁基-1-(乙氧羰基甲氧基)硫杂杯[4]芳烃(>94.0%(HPLC))4-tert-Butyl-1-(ethoxycarbonylmethoxy)thiacalix[4]arene质量规格:>94.0%(HPLC)
T6-Swiss albino细胞,小鼠胚胎成纤维细胞 B16(小鼠黑色素瘤细胞) 非洲绿猴肾细胞;BS-C-14-叔丁基磺酰杯[4]芳烃(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylsulfonylcalix[4]arene质量规格:>98.0%(HPLC)
EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白4-磺酸基硫杂[4]芳烃钠盐(>98.0%(HPLC))4-Sulfothiacalix[4]arene Sodium Salt质量规格:>98.0%(HPLC)
人疱疹病毒(HHV)核酸检测试剂盒供应商CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照) 红四氮唑质量规格:>98%,BRTTC,TTZ,Tetrazolium Red
小鼠颗粒细胞MGC磺胺甲氧哒嗪质量规格:>98%,BRSulfamethoxypyridazine
UI-1细胞,人前列腺癌细胞 大鼠小肠隐窝上皮细胞,IEC-6细胞 人气管平滑肌细胞HTSMC硫酸阿米卡星,硫酸丁胺卡那霉素质量规格:含量674-786ug /mg,USP30Amikacin Sulfate
HOS(人骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2硫酸阿米卡星(标准品)质量规格:效价测定Amikacin Sulfate
22RV1(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H043人肝实质细胞*培养基100mL 人骨骼肌成肌细胞RNAHSkMM miRNA5 μg两性霉素B质量规格:>750ug /mg,USP,细胞培养级Amphotericin B
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
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