钩端螺旋体（Lep）核酸检测试剂盒 返回列表页

技术服务内容：
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

​

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

F7 Others Human 人 F7 / Coagulation Factor VII 人细胞裂解液 (阳性对照) 肉豆蔻醚(标准品)Myristicin质量规格：HPLC≥95%，标准品

NIH3T3 小鼠胚胎成纤维细胞卡枯醇Kakuol质量规格：HPLC≥98%，标准品

猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞;RF/6AL-细辛脂素(标准品)L-Asarinin质量规格：HPLC≥98%，标准品

HNE2, 人鼻咽癌细胞系吉托皂苷元(标准品)Gitogenin质量规格：HPLC≥98%，标准品

黑人Butt淋巴瘤细胞;RAJI 大鼠气管和支气管上皮细胞*培养基 100mL异甘草素Isoliquiritigenin质量规格：≥98%,甘草提取
HEL(悬浮) 红白细胞白血病细胞氟米松Flumethasone质量规格：>99%,BR

HEC-1-A人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-A human endomeial adenocarcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS氟米松（标准品）Flumethasone质量规格：HPLC>98%,标准品

TNFSF13B Protein Human 重组人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 标签)盐酸利托君Ritodrine HCl质量规格：>98%,BR

大鼠海马趾神经细胞(RHh)(1×106) WM451, 人黑色素瘤细胞 Human盐酸利托君(标准品)Ritodrine HCl质量规格：>98%,标准品

人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]硫酸茚地那韦Indinavir sulfate质量规格：>97%
FCAR Others Rat 大鼠 FCAR / CD89 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,5-二氯邻苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))4,5-Dichlorophthalonitrile质量规格：>98.0%(GC)(N)

GHS1 金黄地鼠皮肤成纤维细胞4-十二烷氧基邻苯二甲腈(>99.0%(GC))4-Dodecyloxyphthalonitrile质量规格：>99.0%(GC)

CM-M022小鼠甲状腺上皮细胞*培养基100mL4-叔丁基杯[4]芳烃(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[4]arene质量规格：>98.0%(HPLC)

LX-2, 人肝星形细胞株4-叔丁基杯[5]芳烃(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[5]arene质量规格：>98.0%(HPLC)

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0906 人内脏脂肪细胞*培养基 100mL杯[8]芳烃(>90.0%(HPLC))Calix[8]arene质量规格：>90.0%(HPLC)
钩端螺旋体(Lep)核酸检测试剂盒小鼠真皮成纤维细胞*培养基 100mL煌橙,藏花橙G质量规格：BSCrocein Orange G

HN13口腔鳞状细胞癌细胞 HN13 oral squamous cell carcinoma cells DMEM+10%FBS靛红（吲哚醌）质量规格：ARIsatin

IL23 Protein Human 重组人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白聚乙二醇8000质量规格：>99%,分子生物学级PEG 8000

UM-UC-3(人膀胱移行细胞癌) 5×106cells/瓶×2 HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞氯化锂(分子生物学级)质量规格：>98%Lithium chloride

CM-R097大鼠皮下脂肪细胞*培养基100mL硫酸亚铁铵六水质量规格：>99%,BRAmmonium iron(II) sulfate, hexahydrate