当前位置:上海抚生实业有限公司>>PCR检测试剂盒>>PCR检测试剂盒>> 艰难梭菌(TCD-B)核酸检测试剂盒
产地 | 进口 | 加工定制 | 是 |
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适用领域 | 科研 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
规格 | 48T/盒 |
编号 | FS-R2500 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒构建稳定株)小鼠肝癌细胞 Hepa1-6-EGFP (CMV-GFP leiviral consuct stable sain) of hepatocellular carcinoma cells in mice DMEM+10% FBS石英砂(AR,6-10目或2-3mm)Sand质量规格:AR,6-10目或2-3mm
TNFSF11 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 标签)石英砂(AR,8-16目或1-2mm)Sand质量规格:AR,8-16目或1-2mm
人主动脉平滑肌细胞 (HASMC)( 5×105 ) HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞 Human磷酸二氢铵(SP)Ammonium phosphate monobasic质量规格:SP
小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH2二甲基亚砜(光谱级,>99.9% (GC))Dimethyl sulfoxide质量规格:光谱级,>99.9% (GC)
人脊髓星形胶质细胞(HA-sp)(1×106)N,N-二甲基乙酰胺(光谱级,≥99.8%(GC))N-N-Dimethylacetamide质量规格:光谱级,≥99.8%(GC)
散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ21铬TEriochrome black T质量规格:IND
CD209 Others Human 人 CD209 人细胞裂解液 (阳性对照) 铬蓝REriochrome® Blue Black R质量规格:IND
人胚肾细胞;293 Cells, low passage铬蓝BEriochrome® Blue Black B质量规格:IND
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人细胞裂解液 (阳性对照) 荧光素(IND)Fluorescein质量规格:IND
人支持细胞*培养基 100mL荧光素(AR,90%)Fluorescein质量规格:AR,90%
P3X63Ag8.653细胞,骨髓瘤细胞 耐长春新碱结肠癌细胞系,HCT-8/VCR细胞 CM-H028人淋巴血管内皮细胞*培养基100mLN-Boc-N-去甲伊马替尼N-Boc-N-Desmethyl Imatinib质量规格:美国进口
正常大鼠肾细胞;NRK伊立替康标记物d10Irinotecan Labeled d10质量规格:美国进口
REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-O-甲基-d3-鸟嘌呤6-O-Methyl-d3-guanine质量规格:美国进口
口腔角质细胞培养基OKMN7-(2-氨基甲酰-2-羟乙基)鸟嘌呤N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine质量规格:美国进口
MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2-氨基-6,8-二羟基嘌呤盐酸盐2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride质量规格:美国进口
艰难梭菌(TCD-B)核酸检测试剂盒小鼠神经母细胞瘤细胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]盐酸氨基脲质量规格:>98%,BRAminourea hydrochloride
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸链霉素灭菌溶液,30 mg/ml质量规格:Sterile灭菌溶液,30mg/mlStreptomycin sulfate solution, 30 mg/ml
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM932硫代硫酸铵质量规格:>99%,BRAmmonium thiosulfate
6. 肠胃细胞系统盐酸氨丙啉(>99%,BP)质量规格:>99%,BPAmprolium hydrochloride
CL-0398NCI-H2452(人间皮瘤细胞)5×106cells/瓶×2三氧化二锑(>98%,BR)质量规格:>98%,BRAntimony (III) oxide
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