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| 货号 | FS-X10243 |
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产品介绍:
英文名称：Cisplatin 产品规格：50mg Cisplatin 是一种无机的水溶性的铂配合物，通过形成DNA 交联剂抑制DNA 合成。 Cisplatin 通过与DNA 相互作用形成DNA 交联剂诱导细胞毒性，激活多条信号转导通路, 包括Erk, p53, p73, 和MAPK,其中对激活凋亡影响大。Cisplatin (30 mM)处理HeLa 细胞6小时，显著激活Erk，持续到随后的14个小时期间。Cisplatin 还具有有效的抗肿瘤活性，诱导肿瘤细胞死亡。Cisplatin 可引起肾小管上皮细胞（RPTC）发生细胞凋亡，引起细胞收缩，使caspase 3活性提高50倍，磷脂酰丝氨suan外翻提高4倍，染色质凝集和DNA 倍性分别提高5 和15倍。Cisplatin (800 μM)处理RPTC 4个小时，产生细胞坏死的典型特征。 别名：cisplatinum, CDDP, Platinol and Platinol-AQ ：15663-27-1 分子式：Cl2H6N2Pt 分子量：300.05 储存：-20℃，有效期36个月 |
中文名称：Cisplatin (DNA交联剂/细胞凋亡诱导剂)
英文名称：Cisplatin
产品规格：50mg
货号：FS-X10243
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
酿酒酵母乙酰化组蛋白H2B抗体Human SLC38A1 大鼠KI-67 免疫试剂盒
胶冻样芽胞杆菌乙酰化组蛋白H2B抗体Human SLC25A34 大鼠Kelch样ECH相关蛋白1(KEAP1)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌磷化组蛋白H2AX抗体Human SLC25A33 大鼠I型胶原(COL1)免疫试剂盒
平田头菇6-2磷化热休克蛋白27抗体Human SLC25A45 大鼠II型角蛋白,骨架71(KRT71)免疫试剂盒
藤黄毛壳磷化热休克蛋白70抗体Human ATP6AP2(Renin receptor) 大鼠G蛋白偶联胆汁受体1(GPBAR1)免疫试剂盒
焦曲霉磷化热休克因子1抗体Human SLC27A2 大鼠GTP KRas 免疫试剂盒
酿酒酵母磷化热休克因子1抗体Human SLC25A46 大鼠Ghrelin受体(Ghsr)免疫试剂盒
杂色云芝磷化热休克蛋白70抗体Human SLC27A3 大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)免疫试剂盒
桔青霉E3泛蛋白连接HACE1抗体Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) 大鼠F-肌动蛋白免疫试剂盒
蜡状芽孢杆菌结节性硬化症蛋白1抗体Human SLC22A15 大鼠FMS样酪激3配体(Flt3L)免疫试剂盒
松口蘑肝核因子4α抗体Human SLAIN2 大鼠FMS样酪激3(Flt3)免疫试剂盒
酿酒酵母磷化肝核因子4α抗体Human SLAMF7 大鼠FK506结合蛋白12-雷帕霉相关蛋白1(FRAP1)免疫试剂盒
鲍鱼侧耳淋巴特异性解旋抗体Human SLC10A3 大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)免疫试剂盒
竹针孢座囊菌HRAS样抑制因子2抗体Human SLC12A4 大鼠ERp57 免疫试剂盒
梨多细菌源菌热休克蛋白家族40抗体Human SLC12A2(Solute carrier family 12 member 2) 大鼠E3-RSIκB 免疫试剂盒
嗜盐动性球菌糖蛋白P43抗体Human SLC13A4 大鼠D-乳脱氢(D-LDH)免疫试剂盒
热带假丝酵母Candida│tropicalis 质量规格：10μg/ml,u=5%白桦脂
蜡状芽孢杆菌Bacillus│cereus Frankland and Frankland 质量规格：100μg/ml,u=4%白桦脂
冰岛硫化叶菌Sulfolobus│islandicus 质量规格：10μg/ml,u=6%羽扇豆
Cisplatin (DNA交联剂/细胞凋亡诱导剂)枯草芽孢杆 2-羟基-3-溴-6-磷化α；β水解域包含蛋白5
酿酒酵母 2--3-氟-6-磷化围脂滴蛋白
立枯丝核 2-溴-6-甲基-3-硝基吡啶碱性磷
韩国灵芝 Boc-DL-乙酰酯
玫瑰栗色链霉 四甲基氟化谷脱羧
侧耳属 3-(甲基磺酰基)苯基γ-氨基丁转氨
杆状毛霉 3-羟基-4,4,4-三氟丁乙酯补体因子D
囊轴发仙囊轴亚种 喹啉-4-磷化腺活化蛋白激
微核链霉 3,4,5-三羧苯二单酰
须芒草伯克霍尔德氏 7-羟基庚肾
样品粉碎机 (-)-二甲基-2,3-邻异亚基-L-酯周期依赖性激抑制因子1A
产紫青霉 甘氨酰-L-色P4503A4
大肠埃希 2-溴-4-羟基吡啶补体片段
蘑菇 3-硝基邻苯二卵清蛋白IgG1抗体
Burkholderia anthina 1-氧杂螺[2.5]辛烷-2-甲卵清蛋白IgG2a抗体
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