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货号 | FS-X10241 |
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中文名称:AG 490 (JAK抑制剂)
英文名称:Tyrphostin B42
产品规格:5mg
货号:FS-X10241
产品介绍:
英文名称:Tyrphostin B42 产品规格:5mg AG-490 (Tyrphostin B42)是一种EGFR 抑制剂,IC50为0.1 μM,作用于EGFR 比作用于ErbB2选择性高135倍,对JAK2也有抑制作用,对Lck,Lyn,Btk,Syk 和Src 没有抑制活性。 分子量:294.30 化学式:C17H14N2O3 :133550-30-8 储存:-20℃,有效期24个月 |
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
酿酒酵母人类白抗原G抗体(N端)Human SLCO4C1 大鼠TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)免疫试剂盒
Luteolibacter人类白抗原G抗体(C端)Human SLFNL1 大鼠Tau蛋白免疫试剂盒
埃希氏菌属缺氧诱导基因95抗体Human SLC43A1 大鼠TAR DNA结合蛋白43(TARDBP)免疫试剂盒
白乳菇泛蛋白连接E2抗体Human SLCO6A1 大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫试剂盒
高地芽胞杆菌同源盒蛋白HOXC9抗体Human SLC27A3 大鼠Smad7 免疫试剂盒
晦涩小粘束霉环化核调控阳离子通道蛋白亚型2/4抗体Human SLC30A6 大鼠Smad1 免疫试剂盒
果生链核盘菌转录因子HELT蛋白抗体Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) 大鼠SHC转化蛋白1(SHC1)免疫试剂盒
云南球盖菇转录因子HES6抗体Human SLC35F2 大鼠S100B蛋白(S-100B)免疫试剂盒
骚动厄氏菌同源盒蛋白H6亚型2抗体Human SLC35A1 大鼠S100-A5蛋白(S100A5)免疫试剂盒
Sphingomonas phyllosphaerae硫乙酰肝6脑脂转硫1抗体Human SLC34A2 大鼠Rho相关GTP结合蛋白RhoE 免疫试剂盒
球孢白僵菌神经保护肽HN抗体Human SLC36A4 大鼠Rho鸟交换因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)免疫试剂盒
美澳型核果褐腐病菌大鼠细小病H-1株(H-1)抗体(N端)Human SLC30A6 大鼠Ras相关蛋白Rab-11A 免疫试剂盒
丽齿菌属透明质合成1抗体Human SLC25A18 大鼠Ras相关C3肉底物1(RAC1)免疫试剂盒
美澳型核果褐腐病菌缺氧诱导因子3α/HIF-3α抗体Human SLC34A2 大鼠P选择(P-Selectin/CD62P)免疫试剂盒
黑曲霉缺氧诱导因子脯酰4羟化抗体Human SLC25A15 大鼠P物质受体(SP-R)免疫试剂盒
溶血性曼氏杆菌透明质2/玻璃2抗体Human SLC25A22 大鼠P物质(SP)免疫试剂盒
炭疽芽孢杆菌Bacillus│anthracis 质量规格:分析标准品,99.5%长春质碱
矩圆黑盘孢Melanconium│oblongum Berk. 质量规格:100μg/ml,u=3%文多灵
淡紫拟青霉Paecilomyces│sp. 质量规格:10μg/ml,u=6%(R型)原人参二
AG 490 (JAK抑制剂)球形赖芽孢杆 2-苄基-1-乙his标签蛋白
蚜虫莫氏黑粉 2--5-氟磷化环磷腺
金黄色葡萄球 4--N,N-二苯基苯球蛋白A抗体
纳西杆属 2-氨基-5-溴破伤风IgG
金乳牛肝 2-氨基-6-血管生成1
美澳型核果褐腐病 2--5-氟吡啶-3-羧球蛋白G a2
美澳型核果褐腐病 5-氨基-2-溴-3-内质网氨基肽1
门多萨假单胞 2-氨基-3--5-溴吡啶乙酰
蜡样芽孢杆 溴甲基环戊烷-SH
热带假丝酵母 2-氨基-3--5-溴吡啶N-酰
粉红聚端孢霉 2-基硅氧基-1,3-丁二烯琥珀酰
暗褐色毛霉 4-异硫基苯组蛋白
枯草芽孢杆 6-羟基-3-哒单水合物抗核糖体P蛋白抗体
三叶草根瘤 香叶基酮载脂蛋白E2
杰丁毕赤酵母 5-甲基-3,4-二苯基异噁唑载脂蛋白E4
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