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产地 | 进口 | 加工定制 | 是 |
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适用领域 | 科研 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
英文名称 | Porcine kobuvirus(PKV)()RTPCR |
编号 | FS-R2005 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
十八烷基基溴化1克2~8℃ 大鼠大内皮素1免疫试剂盒 Rat Big endothelin-1 ELISA Kit
羧基清除剂钾盐NA CLIAKitforACP-5b9Humaarate-resistaacidphosphatase5b)ELISAKit人抗酒石酸酸性磷酸酶5b规格:48T/96T
柠檬酸铁100克 羟脯氨酸(HYP)含量高效液相色谱定量检测试剂盒20次
2-苯基氢醌 2-Phenylhydroquinone,97% 1079-21-6 25G 通用试剂 ELISAKitEMAb人抗眼肌抗体规格:48T/96T
甲泛葡胺/甲泛影酰胺/室椎影/Metrizamide 高,98% 1克 国产/进口 大鼠总胆红素(TB)ELISA试剂盒 ,英文名: TB ELISA Kit
DENHARDT'SSOLUTION,100XDENHARDT'S溶液,100X生物技术级透明至黄色溶液FROZENsigma CLIAKitforHLELISAKit大鼠肝脂酶规格:48T/96T
钽酸钾 Potassium heptafluorotantalate(V),99% 16924-00-8 10G 通用试剂 细胞PLK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
甲基二硅烷 Dichloromethylsilane,≥99% 75-54-7 100ML 通用试剂 ELISAKitAP12大鼠apelin12规格:48T/96T
Diwo7iumpxenylphosphatehydrate嶙酸本酯二钠盐25克CP,99% 大鼠羧肽酶A3(CPA3)ELISA试剂盒 ,英文名: CPA3 ELISA Kit
10097-28-6一氧化硅;氧化硅(II)Silicon Monoxide SiO Bovine insulin like growth factor 1 (IGF-1) ELISA Kit 牛胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒
5-(4-bromopxenyl)-pyrinidin-2-ylamine 31483-56-4 humanproviraliegrationsite1,Pim1ELISAKit人前病毒整合位点1(Pim1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
2-双环己基膦-2 '-... 2-Dicyclohexylphosphino-2′-methylbiph... 251320-86-2 1G 表面活性剂 大鼠间隙连接蛋白43(CX43)ELISA试剂盒 ,英文名: CX43 ELISA Kit
CESIUMSULFATE铯sigma Inu Susuke factor II (HC II) ELISA Kit 犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA试剂盒
盐蛋白胨水培养基1米 RatAi-ypsin,ATELISAKit 大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
88-61-9间二-4-磺酸水合物2,4-Dimetxylbenzenesulfonic acid CLIAKitforFFAELISAKit大鼠游离脂肪酸规格:48T/96T
猪嵴病毒库布病毒PCR检测试剂盒供应商2,5-Dichlorothiopxene-3- 57248-14-3 Human alpha enolase (alpha -enolase) ELISA Kit 人α烯醇化酶(α-enolase)ELISA试剂盒
2- 2-Hexanone, 98% 591-78-6 10G 通用试剂 NudemouseAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit 裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
三乙二醇/二缩三乙二醇/乙二醇二(β-醚)/二乙二醇/三甘醇/TEG CP 500毫升 国产/进口 CLIAKitforColIIELISAKit大鼠Ⅱ型胶原规格:48T/96T
wo7iumBORATEBUFFER硼酸钠缓冲液超级500GRT 细胞异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒20次
二本 Xylqnq;Xylol;Xylqnq Mixturq of isoMqr 1330-0-7 RatCiliaryNeuroophicFactor,CFELISAKit大鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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