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货号 | FS-01S63735 |
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产品名称:SALPT土壤碱性蛋白酶检测试剂盒微量法
规格:100管/48样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63735
商品介绍:
测定意义 土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ALPT在碱性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。 测定原理: 碱性条件下,S-ALPT可将酪蛋白水解产生酪氨;在碱性条件下,酪氨还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm有特征吸收峰。 实验中所需仪器及设备: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、双蒸水 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
超氧化物歧化磷甘油变位2Super Oxidase Dimutase
氧化前列腺D合成Phenoloxidase
环氧合肽酰脯酰异构(亲环蛋白)样1cyclooxygenase
超氧化物歧化促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3Super Oxidase Dimutase
抗类固生成细胞抗体血管紧张Ⅰ转化SCA
支链α酮脱氢抑肽branched-chain α-ketoacid dehydrogenase
支链AA转胱天蛋白12branched-chain amino acid aminotransferase
全转运谷蛋白激AHolotranscobalamin
抗糖蛋白抗体解整合样金属蛋白10Glycoprotein antibody
C-C趋化因子受体6基质金属蛋白11C-C chemokine receptor-like 6
磷脂酰肌二磷胸苷合成phosphatidylinositol(4,5)bisphosphate
膜攻击复合物1胸腺嘧核苷磷化membrane attack complex 1
透明质多聚ADP核糖聚合Hyaluronidase
尿盐转运蛋白1葡萄糖激uric acid transporter 1
白细胞酯单氧化Leukocyte esterase
SALPT土壤碱性蛋白酶检测试剂盒微量法抑制A/Inhibin α抗体Human RBM24(RNA Binding Motif Protein 24) ELISA Kit无水磷肌二钠盐
鸡传染性喉气管炎病糖蛋白E抗体Human RBMS2 ELISA Kit无水偏钒钠
小肠型脂肪结合蛋白抗体Human RBM25 ELISA Kit偏重亚硫钠
白介-7受体a抗体Human RBM26 ELISA Kit3-基乙酮
整合α3抗体Human RBP2 ELISA Kit亚麻甲酯
整合β5抗体Human ABCB5(ATP-binding cassette sub-family B member 5) ELISA Kit铬铵
整合α1抗体Human RBMX2 ELISA Kit硫镁
白介2受体β链抗体 IL-2RβHuman RBM39 ELISA Kit2,3,5,4'-四羟基二乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷
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