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SACPT土壤酸性蛋白酶可见分光光度法

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所  在  地上海市

更新时间:2022-04-12 13:59:22浏览次数:96次

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货号 FS-01S63732
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产品名称:SACPT土壤酸性蛋白酶可见分光光度法

规格:50管/24样

检测方法:可见分光光度法

货号:FS-01S63732
商品介绍:

测定意义

土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ACPT在酸性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

测定原理:

酸性条件下,S-ACPT可将酪蛋白水解产生酪氨;在碱性条件下,酪氨还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm有特征吸收峰。

所需仪器及设备:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、双蒸水

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153604.png

粗酶液提取:

1、细胞或组织样品的制备:

培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

成纤维生长因子结合蛋白1(FGFBP1)联免疫试剂盒青霉PSMG1/PAC1 Antibody

成纤维生长因子结合蛋白2(FGFBP2)联免疫试剂盒金针菇(毛柄、冬菇)SIRPα/SHPS1 (D6I3M) Rabbit mAb

成纤维生长因子受体底物2(FRS2)联免疫试剂盒大肠埃希SignalSilence® PTP1B siRNA II

成纤维生长因子受体底物3(FRS3)联免疫试剂盒牛瘟病Artemis (D7O8V) Rabbit mAb

迟现抗原(VLA)联免疫试剂盒 芽孢杆p130 Cas (E1L9G) Rabbit mAb

穿孔蛋白1/成孔蛋白(PRF1/PFP)联免疫试剂盒异常汉逊酵母CYP3A4 (D9U6N) Rabbit mAb

卵泡受体(FSHR)联免疫试剂盒 苏云金芽孢杆锡卢亚种UBE1L2/UBA6 Antibody

垂草扁桃(VMA)联免疫试剂盒 甲基杆属TRIM33 (E1N2Z) Rabbit mAb

角质转谷酰(TGM1)联免疫试剂盒根瘤PGD Antibody

垂体腺苷环化激活肽受体 (PACAPR)联免疫试剂盒寄生曲霉ATP-Citrate Lyase (D1X6P) Rabbit mAb

肝配蛋白A受体10 (EPHA10)联免疫试剂盒伪假苍黄PSMC5/TRIP1 Antibody

雌受体β(ERβ)联免疫试剂盒 多主葡萄壳NUP98 (C39A3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

雌受体α(ERα)联免疫试剂盒 无二柠檬杆LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

雌诱导蛋白PS2 (EIPS2)联免疫试剂盒木贼镰孢Phospho-4E-BP1 (Thr70) (D7F6I) Rabbit mAb

肝配蛋白A5 (EFNA5)联免疫试剂盒香菇Phospho-p90RSK (Ser380) (D5D8) Rabbit mAb (PE Conjugate)
SACPT土壤酸性蛋白酶可见分光光度法亚硝基铁化钠 ACS, ≥99.0% (AT)二氧化硅标准溶液 1000μg/mlAnti-AMPK alpha-1(phospho Ser485+Ser491) /FITC  荧光标记磷化腺苷单磷活化蛋白激α1抗体IgG

甲钠 ≥99%, FCC钠标准溶液 1000μg/mlAnti-AMPK beta-1(phospho Ser108) /FITC  荧光标记兔抗人、大、小鼠磷化腺苷单磷活化蛋白激β1抗体IgG

乙钠,三水 GR,99.5%银标准溶液 1000μg/mlAnti-AMPK beta-1(phospho Ser182) /FITC  荧光标记兔抗人、大、小鼠磷化腺苷单磷活化蛋白激β1抗体IgG

氢钠,一水 AR,99%银标准溶液 100µg/mL,基体:1%HNO3Anti-AMPK Beta1/FITC  荧光标记腺苷单磷活化蛋白激β1抗体IgG

氢钠,一水 CP,98%银标准溶液 100μg/mlAnti-Amylin/FITC  荧光标记兔抗糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体IgG

氢钠,一水 99.98% metals basis钪标准溶液 1000μg/mlAnti-Ang- II /FITC  荧光标记血管紧张II抗体IgG

氟化钠 99.99% metals basis1000µg/mL,基体:10%HCLAnti-ANG-2/FITC  荧光标记血管生成-2抗体IgG

氟化钠 PT硒标准溶液 1000μg/mlAnti-Ankyrin G/ANK-3/ankyrin 3/FITC  荧光标记锚定蛋白G抗体IgG

 


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