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产地 | 进口 | 加工定制 | 否 |
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适用领域 | 科研 |
细胞名称 抗鼠CD4单克隆细胞;YTA 3.1.2说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞分佖CD4不同抗原决定簇单抗,用于CD4单抗的制备。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
抗鼠CD4单克隆细胞;YTA 3.1.2说明书操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
抗鼠CD4单克隆细胞;YTA 3.1.2说明书注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
抗鼠CD4单克隆细胞;YTA 3.1.2说明书美国菌种保藏中心, 又称美国模式菌种收集中心(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上大的生物资源中心,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
BLBMedium
煌绿黄胺嘧啶琼脂 Brilliant Green Agar w/Sulfadiazine 用于沙门氏的分离培养
禽胆盐 Bile salt from poultry 25克 BR
AN厌氧琼脂基础250g/瓶厌氧基础培养基,每培养基中添加和incubationmediaAN厌氧琼脂基础250g/瓶厌氧基础培养基,每培养基中添加和1005
煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB) 250g 用于大肠菌群、大肠杆菌的测定(GB、SN标准)
BLBMedium
煌绿黄胺嘧啶琼脂 Brilliant Green Agar w/Sulfadiazine 用于沙门氏的分离培养
禽胆盐 Bile salt from poultry 25克 BR
AN厌氧琼脂基础250g/瓶厌氧基础培养基,每培养基中添加和incubationmediaAN厌氧琼脂基础250g/瓶厌氧基础培养基,每培养基中添加和1005
煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB) 250g 用于大肠菌群、大肠杆菌的测定(GB、SN标准)
EG培养基250g用于厌氧菌计数
卫矛醇半固体琼脂 Dulcitol Semisolid Agar 生化培养基,用于细菌卫予醇发酵试验(SN标准)
牛脑浸粉 Brain infusion powder 250克 BR
BBL琼脂培养基250g/瓶用于双歧杆菌分离培养incubationmediaBBL琼脂培养基250g/瓶用于双歧杆菌分离培养
LesEndo琼脂 250g 用于滤膜细菌计数
小鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm Actinin-α)ELISA试剂盒 ,英文名: sm Actinin-α ELISA Kit
大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA检测试剂盒RatdipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 96T/48T
人玻连蛋白(VTN)免疫试剂盒 Human vionectin ELISA Kit
Ratiglyceride,TGELISAKit大鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
MGMT基因甲基化程度定量分析试剂盒20次
Porcineepidemicdiarrheavirusaibody,PEDVELISA试剂盒猪流行性腹泻病毒抗体(PEDV)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人胃癌标志物ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猪多肽YY(PYY)免疫试剂盒 Pig Peptide YY,PYY ELISA kit
Chicken17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit 鸡17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanneuophilelastase,NEELISA试剂盒人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
ELISAKitMHCⅢ/SLAⅢ猪主要组织相容性复合体Ⅲ类规格:48T/96T
HumanFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit人血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
抗鼠CD4单克隆细胞;YTA 3.1.2说明书山羊雌三醇(E3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human pancreatic cancer marker CA242ELISA Kit 人胰腺癌标志物CA242ELISA试剂盒
Humanα-glathioneS-ansferases,α-GSISAKit 人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISA试剂盒人鸟苷酸解离抑制因子(GDI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织脯氨酸(proline)含量比色法定量检测试剂盒20次
humanMAXdimerizationprotein1,mxd1ELISAKit人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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