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当前位置：上海抚生实业有限公司>>生化检测试剂盒>>糖酵解系列>> PK丙酮酸激酶检测试剂盒微量法
| 货号 | FS-01S63489 |
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商品介绍：
测定意义 PK（EC 2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP的关键酶之一，因此测定PK活性具有重要意义。 测定原理 PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PK活性。 需自备的仪器和用品 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒，质量信得过产品，售后完善。服务于高校及免疫学科研单位，竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。
产品名称：PK丙酮酸激酶检测试剂盒微量法
规格：100管/96样
检测方法：微量法
货号：FS-01S63489
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
绵羊组织多肽抗原(TPA)联免疫试剂盒筑波拟酵母Mouse TRF (Transferrin) ELISA Kit
绵羊二氢硫辛转乙酰(DLAT)联免疫试剂盒胶孢Mouse TFR2 (Transferrin Receptor Protein 2) ELISA Kit
绵羊C型凝集结构域家族2成员C(CLEC2C)联免疫试剂盒 弗雷德里克斯堡假单胞Mouse TFR (Transferrin Receptor) ELISA Kit
绵羊核孔蛋白35kda(NUP35)联免疫试剂盒微小链霉Mouse TGFbI (Transforming Growth Factor Beta Induced) ELISA Kit
绵羊烟酰腺二核苷磷氧化5(NOX5)联免疫试剂盒彩色豆马勃Mouse TGF-α (Transforming Growth Factor α) ELISA Kit
绵羊T急性母白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)联免疫试剂盒扩展青霉Mouse TGFb2 (Transforming Growth Factor Beta 2) ELISA Kit
绵羊胰蛋白原II(Try2)联免疫试剂盒 巴斯德毕赤酵母Mouse TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) ELISA Kit
绵羊上皮型钙粘蛋白 (E-Cad)联免疫试剂盒 苏云金芽孢杆库尔斯塔克亚种Mouse TGF-β4 (Transforming Growth Factor β4) ELISA Kit
绵羊谷脱羧1(GAD1)联免疫试剂盒斑污拟盘多孔孢Mouse TG (Transglutaminase) ELISA Kit
绵羊促睡眠肽α(δSIP-α)联免疫试剂盒 灰平链霉Mouse TMED1 (Transmembrane Emp24 Domain Containing Protein 1) ELISA Kit
绵羊β淀粉样前体蛋白(βAPP)联免疫试剂盒酿酒酵母Mouse TNPO1 (Transportin 1) ELISA Kit
绵羊脑多巴神经营养因子(CDNF)联免疫试剂盒 淡紫拟青霉Mouse TTR (Transthyretin) ELISA Kit
绵羊胰腺再生蛋白1α(REG1α)联免疫试剂盒费比恩毕赤酵母Mouse TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit
绵羊VIII型胶原α1(COL8α1)联免疫试剂盒 匍匐曲霉Mouse TFF3 (Trefoil Factor 3, Intestinal) ELISA Kit
绵羊踝蛋白(TLN)联免疫试剂盒Rhodobacter vinaykumariiMouse TNNI3/cTn-I (Troponin I Type 3, Cardiac) ELISA Kit
PK丙酮酸激酶检测试剂盒微量法锡 AR,99.5%甲中氯代类混合标样氯代类:氯、1, 2－二氯、1, 4－二Anti-Bcl-10/CLAP/FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗体IgG
锡 AR,100目一氯二溴标准溶液分析标准品,溶剂:甲Anti-Bcl-10(phospho Ser218)/FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠磷化Bcl-10抗体IgG
锡 SP氯代类：氯、1,2－二氯、1,3－二氯、1,4－二氯、1,2,4Anti-Bcr/CD3D/FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠T受体抗体IgG
锡 99.99% metals basis邻二甲二甲酯标准溶液 1000μg/ml，溶剂：甲Anti-Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠磷化T受体抗体IgG
高纯锡 99.999% metals basis，1-6mm，颗粒邻二甲二甲酯标准溶液5000μg/ml，溶剂：甲Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21 /FITC 荧光标记三磷腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体IgG
锡 99.9999%邻二甲二丁酯标准溶液200μg/ml，溶剂：甲Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 荧光标记缓激肽B2受体抗体IgG
锡 99.99999%2,6-二甲标准溶液 1000μg/ml，溶剂：甲Anti-BDNF/FITC 荧光标记BDNF蛋白抗体IgG
1,1,2-三氯乙烷 99%对二氯标准溶液 1000μg/ml,溶剂：甲Anti-BECN1/FITC 荧光标记一种抑癌基因抗体IgG
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