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货号 | FS-01S63765 |
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产品名称:SβXYS土壤β木糖苷酶可见分光光度法
规格:50管/24样
检测方法:可见分光光度法
货号:FS-01S63765
商品介绍:
测定意义 β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。 测定原理: 4-羟甲基-7-香豆(MUB)在 365 nm波长处激发, 能在 470 nm处检测到荧光, 它与某些物质结合后荧光特性消失, 通过酶的水解作用MUB释放出来, 通过检测荧光量来表征酶活性。 自备仪器和用品: 多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
TPD52/Prostate and colon associated protein 前列腺癌和结肠癌相关蛋白 * 0.2ml
TPD54/TPD52L2 肿瘤蛋白D54蛋白抗体 * 0.2ml
TRIM47 星形细胞瘤高表达蛋白抗体(环指蛋白100) * 0.2ml
TSP50 肿瘤/抗原20抗体 * 0.2ml
TULP2/CT65/Cancer testis antigen 65 肿瘤/抗原65 * 0.2ml
TERT/EST2/Telomerase reverse transcriptase 端粒相关蛋白2抗体(端粒逆转录) * 0.2ml
UBAP1 泛相关蛋白1抗体(鼻咽癌相关基因20蛋白) * 0.2ml
UXT/Ubiquitously expressed transcript 广泛表达转录蛋白UXT抗体 * 0.2ml
WDR16 WD重复蛋白16抗体 * 0.2ml
WDR19 WD重复膜蛋白19抗体 * 0.2ml
WSB2/WD SOCS box protein 2 信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2抗体 * 0.2ml
WWP1 WW结构域E3泛连接1抗体 * 0.2ml
YY1AP1/HCCA2 肝癌相关蛋白2抗体(转录因子YY1结合蛋白1抗体) * 0.2ml
ZNF146 锌指蛋白146抗体 * 0.2ml
ZNF23 锌指蛋白23抗体 * 0.2ml
SβXYS土壤β木糖苷酶可见分光光度法硬脂甲酯 CP,45%(GC)十溴二 98%Kim-1(Human Kidney injury molecule 1) ELISA Kit 人肾损伤分子1
硬脂甲酯 分析标准品,>99.5% (GC)三乙基硅烷 99%AQP-5(Human Aquaporin 5) ELISA Kit 人水通道蛋白5
色标Standard for GC,≥99.5% (GC)4-溴甲酰氯 96%AQP-4(Human Aquaporin 4) ELISA Kit 人水通道蛋白4
硬脂甲酯 95%4-(氯甲基)甲酰氯 98%AQP-3(Human Aquaporin 3) ELISA Kit 人水通道蛋白3
油甲酯 CP,≥60.0% (GC)间氯甲酰氯 97%AQP-2(Human Aquaporin 2) ELISA Kit 人水通道蛋白2
4-雄烯-4--3,17-二酮 99%4-氯丁酰氯 98%AQP-1(Human Aquaporin 1) ELISA Kit 人水通道蛋白1
(R)-(+)-苎烯 97%2,4-二氯甲酰氯 98%AQP-0(Human Aquaporin 0) ELISA Kit 人水通道蛋白0
四烷络合物 1M solution in THF3,5-二甲酰氯 97%RF(Human rheumatoid factor) ELISA Kit 人类风湿因子
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