猕猴皮肤细胞；MMS4说明书 返回列表页

细胞名称 猕猴皮肤细胞；MMS4说明书
形态特性  成纤维细胞样 　
生长特性  　贴壁生长
特征特性   该细胞系来源于一雌性猕猴的皮肤组织。2000年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%FBS　
传代方法   1:2传代；3-4天一次
传代情况  P3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测  　荧光法（-）
STR   -
同工酶

染色体

使用权限 B类
猕猴皮肤细胞；MMS4说明书操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
猕猴皮肤细胞；MMS4说明书注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
猕猴皮肤细胞；MMS4说明书美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
疱肉牛肉粒加入疱肉基础，配成疱肉培养基

MFB培养基 MFB Medium 用于李斯特氏菌的选择性增菌培养

庆大霉素琼脂 Gentamycin Agar 250克 用于霍乱弧菌的分离培养

霉菌和酵母菌显色培养基l用于霉菌和酵母菌的显色培养incubationmedia霉菌和酵母菌显色培养基l用于霉菌和酵母菌的显色培养

乙基紫叠氮肉汤(litsky肉汤) 250g 用于链球菌增菌培养
SulfiteAgar

DEV glutamate broth DEV谷氨酸盐肉汤 1.10687.0500 MERCK默克 incubation media DEV glutamate broth DEV谷氨酸盐肉汤 1.10687.0500 MERCK默克

结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA) 250g 用于阪崎肠杆菌的选择性分离培养以及肠道菌的计数和鉴别(SN/T 1632.1-2005)。

脐血间质干细胞成脂诱导分化培养基Umbilicalcordbloodmesenchymalstemcel
肠道菌增菌肉汤2250g用于肠道菌的增菌培养

麦芽浸膏肉汤 (CM0057) Oxoid incubation media 麦芽浸膏肉汤 (CM0057) Oxoid

拟囊体侧耳、(鲍鱼菇) 用于酿造白葡萄酒 支/瓶

ModifiedSorbitolMacConkeyAgarAdditives

甘露醇盐琼脂培养基 250g 用于金黄色葡萄球菌选择性分离培养
CM-R028大鼠食管平滑肌细胞*培养基100mL

FAM3B Others Human 人 FAM3B 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠成年表皮角质形成层细胞*培养基 100mL

YAC-1小鼠淋巴瘤细胞 YAC-1 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IL17RD Protein Canine 重组狗 IL17RD 蛋白 (His 标签)

人脉络丝表皮细胞 (HCPEpiC)( 5×105 ) 人脐带血单个核细胞 Saos-2，人成骨肉瘤细胞
CM-R028大鼠食管平滑肌细胞*培养基100mL

FAM3B Others Human 人 FAM3B 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠成年表皮角质形成层细胞*培养基 100mL

YAC-1小鼠淋巴瘤细胞 YAC-1 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IL17RD Protein Canine 重组狗 IL17RD 蛋白 (His 标签)

人脉络丝表皮细胞 (HCPEpiC)( 5×105 ) 人脐带血单个核细胞 Saos-2，人成骨肉瘤细胞
猕猴皮肤细胞；MMS4说明书MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人肺动脉内皮细胞RNAHPASMC miRNA5 μg

猪细胞;ST

U251细胞，胶质瘤细胞 鼠成纤维细胞系,NIH/3T3细胞 人肺巨细胞癌低转移细胞株;PG-LH7

KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株;B22

PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人细胞裂解液 (阳性对照)
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