非洲绿猴肾细胞系/IgR；VERO/IgR说明书 返回列表页

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细胞名称  非洲绿猴肾细胞系/IgR；VERO/IgR说明书
形态特性  上皮样细胞 　
生长特性  　贴壁生长
特征特性   该细胞为Vero细胞的克隆系。
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS　
传代方法   1:3传代,2-3天传一代
传代情况  C19
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测  　阴性
STR   
同工酶 同工酶鉴定

染色体

使用权限 A类
非洲绿猴肾细胞系/IgR；VERO/IgR说明书操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
非洲绿猴肾细胞系/IgR；VERO/IgR说明书注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
非洲绿猴肾细胞系/IgR；VERO/IgR说明书美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
尿素琼脂培养基基础23090250g用于鉴别肠道菌尿素酶试验(GB4789.4-20华人民共和国药典》20SN02和GB.

7541-prf MADM-prf 间充质干细胞脂肪细胞分化培养基 500 ml incubation media 7541-prf MADM-prf 间充质干细胞脂肪细胞分化培养基 500 ml

VioletRedBileAgar

胺蓝-DNA酶琼脂于核糖核酸酶检测

产组胺菌培养基 250g 用于产组胺菌分离培养。
NaHCO3AgarBase

DHL agar acc.to SAKAZAKI 硫化氢乳糖琼脂 1.11435.0500 MERCK默克 incubation media DHL agar acc.to SAKAZAKI 硫化氢乳糖琼脂 1.11435.0500 MERCK默克

脱脂奶蔗糖胰蛋白胨琼脂 250g 用于致病性嗜水气单胞菌的脱脂奶平板试验(GB/T 18652-2002)。

Balb/c小鼠脂肪间质干细胞成脂诱导分化培养基Balb/cmouseadiposemesenchymalstemcel
BPL琼脂250g用于食品中沙门氏菌选择性分离培养

麦康凯肌醇阿东醇羧卞青霉素琼脂(MZAC) 250g 用于食品中克雷伯氏菌分离培养

哥伦比亚血琼脂基础 Columbia Blood Agar Base 250 营养非常丰富，用各种细菌的基础培养基(AFNOR EP IDF标准)

氯胰蛋白胨稀释液250g/瓶用于样品的制备与稀释(SN)incubationmedia氯胰蛋白胨稀释液250g/瓶用于样品的制备与稀释(SN)

PlateCountAgar
CM-R005大鼠气管平滑肌细胞*培养基100mL

IL22RA1 Others Canine 狗 IL22RA1 / IL22R 人细胞裂解液 (阳性对照)

人主动脉成纤维细胞HAF

3T3-L1细胞，小鼠脂肪细胞 人癌细胞,MCF-7(NEW)细胞 大鼠星形胶质细胞RA

新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF

CSF1R Others Human 人 M-CSFR 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-R005大鼠气管平滑肌细胞*培养基100mL

IL22RA1 Others Canine 狗 IL22RA1 / IL22R 人细胞裂解液 (阳性对照)

人主动脉成纤维细胞HAF

3T3-L1细胞，小鼠脂肪细胞 人癌细胞,MCF-7(NEW)细胞 大鼠星形胶质细胞RA

新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF

CSF1R Others Human 人 M-CSFR 人细胞裂解液 (阳性对照)
非洲绿猴肾细胞系/IgR；VERO/IgR说明书HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人细胞裂解液 (阳性对照)

结肠平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]

Ke-3细胞，人肾癌细胞 大鼠鼻咽癌细胞,FAT细胞 CL-0186PIEC(猪髋动脉内皮细胞 )5×106cells/瓶×2

U-937(人组织细胞淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

HPlEpC-c 人类胎盘细胞上皮细胞 500,000cells 食管平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)