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货号 | FS-X10279 |
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产品介绍:
英文名称:EPZ-6438 产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg EPZ-6438抑制含人PRC2的野生型EZH2,Ki为2.5±0.5nM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! 号:1403254-99-8 别名:Tazemetostat;E-7438 纯度:99.63% 分子量:572.74 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
中文名称:含人PRC2的野生型EZH2抑制剂
英文名称:EPZ-6438
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
货号:FS-X10279
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
木霉真核翻译起始因子4E抗体Human RAMP3 脂肪甘油三酯脂(ATGL)
壁节杆菌核蛋白4抗体(Ran结合蛋白4)Human ABCC6(Multidrug resistance-associated protein 6) 脂肪分化相关蛋白(ADRP)
展示接霉免疫球蛋白重链可变区抗体Human RANBP10 脂多糖结合蛋白(LBP)
彩色豆马勃胰岛样生长因子结合蛋白7抗体Human RARG 脂多糖/内(LPS)
谷棒杆菌胰岛样生长因子结合蛋白6抗体Human RANBP3L 脂多糖(LPS)
苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种KB抑制蛋白激εHuman RARRES3 脂蛋白脂(LPL)
平菇(雪莲菇)整合β4抗体Human RAD9A 脂蛋白脂肪(LPL)
乳杆菌属磷化白介-7受体a抗体Human RAD51B(DNA repair protein RAD51 homolog 2) 脂蛋白相关磷脂A2(Lp-PLA2)
梅林青霉磷化胰岛受体底物-1抗体Human RADIL 脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)
副猪嗜血杆菌磷化胰岛受体底物2抗体Human PTPRQ(Phosphotidylinositol phosphatase PTPRQ) 脂蛋白磷脂A2(Lp-PLA2)
枯草芽孢杆菌磷化KB抑制蛋白激β抗体Human Radixin 脂蛋白α(Lp-α)
鲁氏不动杆菌磷化KB抑制蛋白激β抗体Human RAF1 脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)
赖芽胞杆菌属磷化KB抑制蛋白激β抗体Human RAE1 正常T表达和分泌因子(RANTES/CCL5)
小单孢菌磷化KB抑制蛋白激β抗体Human RAI1 整合连接激1(ILK-1)
大肠埃希菌磷化KB抑制蛋白激β抗体Human RAI14 整合β4结合蛋白(ITGB4BP)
pHY300PLK磷化整合连接激1抗体Human RALA 整合αM型(ITG αM/CD11b)
: HBUM71449资源名称: 链霉菌 质量规格:>99.5%(GC),标准物质山茱萸新
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:>98.0%(GC),标准物质丁东莨菪碱
ATCC35564资源名称: 栖麦假单胞菌 质量规格:>99.0%(GC),标准物质细叶远志皂
含人PRC2的野生型EZH2抑制剂枯草芽孢杆 2--6-氟苯哇巴因
金黄色葡萄球(质控) 5-乙酰戊肠三叶因子3
菜豆间座壳 对甲苯磺铁六水合物二肽基肽Ⅷ
嗜血苯基杆 3-氨基-5-甲基吡唑二肽基肽Ⅸ
隔离德沃斯氏 3,5-吡唑二甲组织蛋白B
球孢白僵 4-氨基-5,6-二嘧啶固调节元件结合蛋白-1C
烬灰土类芽孢杆 2,4,6-基-1,3-苯二乙酰
树舌灵芝(平盖灵芝) R-3-N-Boc-3-甲氨基NADH脱氢
枯草芽孢杆 4-苯氧基苯尿激
大肠埃希氏 2,2-二苯基环S-腺甲硫
Maritalea myrionectae 锂糖原合成
杰丁毕赤酵母 草锂糖原合成
白囊耙齿 正十二烷Rho关联含卷曲螺旋蛋白激2
灰略红链霉 2--4,6-二增值核抗原
鲍氏桑黄 (R)-(+)-1-苯胃泌释放肽抗体
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