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ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
胰蛋白酶原ⅡELISA试剂盒免费包邮 | Trypsinogen-2 | FS-P66043 |
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1进口抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5公司产品仅用于科研可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
整联蛋白重复蛋白3抗体Goat Anti- Rb IgM/FITC 荧光素标记羊抗兔IgM头孢唑啉(标准品)胞裂蛋白3(SEPT3)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白1抗体Goat Anti-rat IgG/FITC 荧光素标记羊抗大鼠IgG文多灵(标准品)胞裂蛋白2(SEPT2)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白2抗体Goat Anti-rat IgM/FITC 荧光素标记羊抗大鼠IgM茶碱(标准品)胞裂蛋白14(SEPT14)ELISA试剂盒
磷化整合素β4抗体Goat Anti-Guinea IgG/FITC 荧光素标记羊抗豚鼠IgG酰新乌头原碱(标准品)胞裂蛋白13(SEPT13)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子结合蛋白1抗体Mouse Anti-goat IgG/FITC 荧光素标记小鼠抗羊IgG葫芦巴碱(标准品)胞裂蛋白12(SEPT12)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子结合蛋白4抗体Mouse Anti-goat IgM/FITC 荧光素标记小鼠抗羊IgM琥珀;丁二胞裂蛋白11(SEPT11)ELISA试剂盒
整合素α7抗体Mouse Anti-human IgG/FITC 荧光素标记小鼠抗人IgG琥珀;丁二(标准品)胞裂蛋白10(SEPT10)ELISA试剂盒
白介素7抗体Mouse Anti-rabbit IgG/FITC 荧光素标记小鼠抗兔IgGα-乳香(标准品)胞裂蛋白1(SEPT1)ELISA试剂盒
白介素6受体α/IL-6Rα抗体Mouse Anti-rat IgG/FITC 荧光素标记小鼠抗大鼠IgG野马追内酯A(标准品)胞浆磷蛋白4(STMN4)ELISA试剂盒
白介素9抗体Mouse Anti-rat IgM/FITC 荧光素标记小鼠抗大鼠IgM野马追内酯B(标准品)胞浆磷蛋白3(STMN3)ELISA试剂盒
整合素αL抗体Integrin αLRabbit Anti-MK IgG/FITC 荧光素标记兔抗猴IgG长春瑞滨(标准品)胞浆磷蛋白2(STMN2)ELISA试剂盒
干扰素α抗体Rabbit Anti-MK IgM/FITC 荧光素标记兔抗猴IgM长春瑞滨(标准品)胞浆磷蛋白1(STMN1)ELISA试剂盒
磷化肌聚磷盐磷酶样蛋白1抗体Rabbit Anti-pig IgG/FITC 荧光素标记兔抗猪IgG硝呋太尔胞浆抗蛋白水解酶3(CAP3)ELISA试剂盒
磷化肌聚磷盐磷酶样蛋白1抗体Rabbit Anti-Pig IgM/FITC 荧光素标记兔抗猪IgM硝呋太尔(标准品)胞浆抗蛋白水解酶2(CAP2)ELISA试剂盒
抑制素βC抗体Rabbit Anti-Dog IgG/FITC 荧光素标记兔抗狗IgG3-呋喃胞浆多聚A结合蛋白1样蛋白(PABPC1L)ELISA试剂盒
胰蛋白酶原ⅡELISA试剂盒免费包邮Anti-KITLG Antibody酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
Anti-KITLG Antibody叶生布勒担子酵母拉丁属名: Bulleribasidium foliicola
Anti-KLF3 Antibody大肠埃希氏杆菌拉丁属名: Escherichia coli
Anti-KLF4 Antibody圆锥曲霉拉丁属名: Aspergillus conicus
Anti-KLF4 Antibody单胞菌属拉丁属名: Polaromonas glacialis
Anti-KLF4 Antibody产气荚膜梭菌 素C型拉丁属名: perfringens Type C
Anti-KLF8 Antibody猪丹丝菌拉丁属名: rhuriopathiae
Anti-KLF5 Antibody不动杆菌用途: 在无机盐培养中以100mg/L的邻苯二酚为碳源培养,3天内降解率大于90%
Anti-KLF6 Antibody苏云金芽孢杆菌肯尼亚亚种拉丁属名: Bacillus thuringiensis subsp. Kenyae
Anti-KLK1 Antibody变形假单胞菌拉丁属名: Pseudomonas plecoglossicida
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准
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