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CDK4和CDK6抑制剂(LEE011)

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所  在  地上海市

更新时间:2022-05-18 11:37:10浏览次数:144次

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货号 FS-X10335
CDK4和CDK6抑制剂(LEE011)正在热销的产品:PMP2 /FITC 荧光标记周围神经髓鞘蛋白2抗体IgGN-酰-D-亮氨 99%
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PMS2/FITC 荧光标记肿瘤错配修复因PMS2

产品介绍:

英文名称:LEE011

产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

LEE011是一种高特异性的CDK4/6抑制剂,IC50分别为10nM和39nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

号:1211441-98-3

别名:Ribociclib

纯度:99.82%

分子量:434.54

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

中文名称:CDK4和CDK6抑制剂(LEE011)

英文名称:LEE011

产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

货号:FS-X10335

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

培养操作步骤:

1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

褐粘褶菌微小染色体维持缺陷蛋白3抗体Human NEDD4L 皮质抑/皮质稳定蛋白(CORT)

Marella endophytica基质金属蛋白-26抗体Human HK1(Hexokinase-1) 皮质/肾上腺(CORT)

坚强芽孢杆菌丝裂原活化蛋白激激4抗体Human NEK3 皮质(CORT)

白僵菌MYOZ抗体Human NEK11 皮质-3(Cortxin-3)

毛柄金钱菌(金针菇)单核趋化蛋白2抗体Human NDUFS1 皮质类固结合球蛋白(CBG)

黄曲霉甲基化样蛋白11抗体(N端)Human NEK9 皮质(Cortisol)

大双歧杆菌大肠癌肿瘤突变蛋白抗体Human NDUFS3 皮肤淋巴相关抗原(CLA)

彩色豆马勃丝/苏蛋白激MARK4抗体Human NELF 皮肤蛋白(DPT)

多变毛霉甲肽水解抗体Human NDUFS5 皮肤T虏获趋化因子(CTACK/CCL27)

假单胞菌磷化丝裂原活化蛋白激激2抗体Human NDUFS6 皮动蛋白(CTTN)

溜曲霉磷化丝裂原活化蛋白激激3抗体Human FOXO3(Forkhead box protein O3) 胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)

粘性放线菌丝裂原活化蛋白激激5抗体Human NDUFV1 泡状过表达癌症促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)

戈壁发链霉菌磷化丝裂原活化蛋白激激5抗体Human XDH(Xanthine dehydrogenase/oxidase) 膀胱肿瘤抗原(BTA)

黑曲霉磷化丝裂原活化蛋白激激5抗体Human MYBBP1A(Myb-binding protein 1A) 膀胱癌抗原(UBC)

链格孢磷化丝裂原活化蛋白激激5抗体Human TLR4(Toll-like receptor 4) 排序连接蛋白3(SNX3)

总状共头霉磷化丝裂原活化蛋白激激5抗体Human MYBPC1 帕金森氏病2Parkin(Park2)

黑曲霉Aspergillus│niger 质量规格:>99%,分子生物学级;紫杉

大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:>99%,进分sigma

坚强芽胞杆菌Bacillus│firmus 质量规格:>98%芝麻林
CDK4和CDK6抑制剂(LEE011)香菇 2-溴苯硫抵抗

香气红冬孢锁掷孢酵母 2--6-甲抵抗样分子α

根瘤 2,4,6-三苯甲淀粉

马氏副球 4-苄基苯淀粉样前体蛋白

谷棒杆 3,5-二苯凋亡相关因子

中国台湾根霉 3,4-二苯甲凋亡相关因子配体

根瘤 二硫烷凋亡诱导因子

孟加拉副球 2,4-二苯丁酰酯

茄链格孢 2,3-二苯蕈碱型乙酰受体

鼠李糖乳杆 2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯端粒

奇异酵母 4--3-三氟甲基苄对苯

植物乳杆 L-赖对氧磷1

假单胞属 4-溴-3-氟苯多巴

裂褶 2,3,4,6-四-O-苄基-alpha-D-吡喃葡萄糖多巴D1受体

产二链霉 4-氟邻苯二多巴D2受体

 


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