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MEK1抑制剂(Cobimetinib)

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更新时间:2022-05-18 11:39:48浏览次数:116次

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货号 FS-X10341
MEK1抑制剂(Cobimetinib)正在热销的产品:Phospho-PSD93 (Tyr340) /FITC 荧光标记化突触后密度蛋白93抗体IgGH-Asp(OtBu)-2-Chlorotrityl Resin 0.3~0.8 mmol/g,100~200 mesh
PSD-95/FITC 荧光标记突触后密度蛋白95抗体IgGFmoc-D-Ala-Wang resin 100-200me

中文名称:MEK1抑制剂(Cobimetinib)

英文名称:Cobimetinib

产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

货号:FS-X10341

产品介绍:

英文名称:Cobimetinib

产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

Cobimetinib是一种有效的具有选择性的MEK抑制剂,能够抑制MEK1的活性,IC50值为4.2nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

号:934660-93-2

别名:GDC-0973;XL518

纯度:98.79%

分子量:531.31

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

培养操作步骤:

1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

芽孢乳菌干粉拟南介金属离子转运蛋白抗体Human MIER2 脑源性神经生长因子(BDNF)

酿酒酵母中脑核仁蛋白抗体Human MIER1 脑钠/脑钠尿肽(BNP)

豌豆根瘤菌肌球蛋白重链7抗体Human F12(Coagulation factor XII) 脑钠(BNP)

微白黄链霉菌肌间蛋白1抗体Human MGAT1 脑红蛋白(NGB)

河北链霉菌肌间蛋白2抗体Human MGAT4A 脑啡肽(ENK)

费氏中华根瘤菌肌球蛋白轻链激3抗体Human MGAT5B 脑肠肽(Ghrelin)

大肠埃希菌肌球蛋白轻链激2抗体Human MGEA5(Protein O-GlcNAcase) 脑肠肽(BGP/Gehrelin)

酿酒酵母丝裂原活化蛋白激3K10抗体Human MGAT4C 囊虫病抗体(CYT Ab)

芽枝状枝孢丝/苏蛋白激MST4抗体Human mGluR1 难辨梭状芽孢杆菌B(TOXB)

葡糖醋杆菌属肌球蛋白7a/常染色体隐性耳聋蛋白2抗体Human KLK8(Kallikrein-8) 难辨梭状芽孢杆菌A(TOXA)

杂色曲霉膀胱癌突变蛋白1抗体Human MFSD7 钠-化物依赖性牛磺转运体(SLC6A6/TAUT)

球孢白僵菌肌肉特定环指蛋白3抗体Human mGluR2 母亲DPP同源物4(Smad 4)

栗疫菌肠分化相关因子1抗体Human MFSD8 末端脱氧核转移(TdT)

樊庆生氏红球菌环指蛋白62抗体Human MGAT4C 末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)

泛菌属MHC I类链相关蛋白BHuman MGAT1 膜内酰基肽(ANPEP)

酿酒酵母膜蛋白MLC1抗体Human MGAT4A 膜联蛋白A5(AnnexinA5)

胶孢Colletotrichum│gloeosporioides 质量规格:≥97% ,进分胡黄连III

链霉菌Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,BR胡黄连II

海棍状菌Maritimibacter│sp. 质量规格:>98%,BR胡黄连I
MEK1抑制剂(Cobimetinib)细孢毛霉 3-(3-吡啶基)-L-骨成型蛋白受体Ⅱ

球孢白僵 3-羟基盐盐骨钙

木贼镰孢 D(+)-乳糖一水合物骨碱性磷

仙人掌有孢汉逊酵母 3,4-二甲氧基苯骨桥

蔷薇生链格孢 叔丁氧羰酰基6-氨基己骨特异性碱性磷

异常毕赤酵母 二甲基二乙氧基硅烷骨特异性碱性磷B

大丽轮枝孢 三苯基膦氢盐骨涎蛋白

硫磺(硫色多孔) 2,5-二苯骨原交联

瓶霉属 血清胸腺因子固调节元件结合蛋白

马德里毛壳 4-氨基-3-甲固调节元件结合蛋白1

大肠埃希氏(大肠杆) 2,5-二氟苯固调节元件结合蛋白1c

柿盘多毛孢 5-溴-8-硝基异喹啉固胆固转运蛋白NPC1L1

毛耳白背 乙锰胱硫β-合成

沼泽红假单胞 2,4-二氟苯过氧化氢

弓形虫(GT0株) 苯基膦过氧化物

 


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