当前位置:上海抚生实业有限公司>>ELISA试剂盒实验原理>>人ELISA试剂盒实验原理>> 48T/96TPⅢNP人Ⅲ型前胶原肽ELISA试剂盒实验原理
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
产品名称 | PⅢNP人Ⅲ型前胶原肽ELISA试剂盒实验原理 |
英文名称 | Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide, PⅢNP Elisa Kit |
货号 | FS-H63442 |
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准
Amanita│pantherina (DC.) Krombh. 豹斑鹅膏菌Amanita│pantherina (DC.) Krombh.分离基物:马尾松下斜面培养物安全等级:1150生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:98%
Pachykytospora│alabamae (Berk. & Cooke) Ryvarden 亚拉巴马全缘孔菌Pachykytospora│alabamae (Berk. & Cooke) Ryvarden分离基物:子实体斜面培养物安全等级:1模式菌株:no14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:98%
Fomitiporia│punctata (Fr.) Murrill 斑点嗜蓝孢孔菌Fomitiporia│punctata (Fr.) Murrill分离基物:子实体斜面培养物安全等级:1模式菌株:no14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:99%
rmitomyces│microcarpus (Berk. & Broome) R. Heim 果鸡枞rmitomyces│microcarpus (Berk. & Broome) R. Heim分离基物:子实体斜面培养物安全等级:1模式菌株:no14生长条件:28存储条件:定期移植法 纯度:99%
Fomitopsis│cupreorosea (Berk.) J. Carranza & Gilb. 迷孔肉色扇Fomitopsis│cupreorosea (Berk.) J. Carranza & Gilb.分离基物:菌体斜面培养物安全等级:1模式菌株:no14生长条件:27存储条件:定期移植法 纯度:99%
Russula│albida Peck 白菇Russula│albida Peck分离基物:菌体斜面培养物安全等级:1模式菌株:no14生长条件:27存储条件:定期移植法 纯度:98%
Russula│alutacea (Fr.) Fr. 大红菇Russula│alutacea (Fr.) Fr.分离基物:菌体斜面培养物安全等级:1模式菌株:no14生长条件:27存储条件:定期移植法 纯度:99%
Russula│decolorans (Fr.) Fr. 褪色红菇Russula│decolorans (Fr.) Fr.分离基物:菌体斜面培养物模式菌株:no14生长条件:27存储条件:定期移植法 纯度:99%
PⅢNP人Ⅲ型前胶原肽ELISA试剂盒实验原理Collagen VII Ⅶ胶原抗体羊藿苷4-甲硫基苯乙Human MANF (Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit
Collagen V Ⅴ型胶原抗体异补骨脂素4-甲硫基苯乙Human MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit
Collagen X Ⅹ型胶原抗体补骨脂素4-甲硫基苯乙Human AhR (Aryl Hydrocarbon Receptor) ELISA Kit
Contactin-6 NB-3神经粘附蛋白抗体秦皮甲素Eletriptan HBrHuman ARSA (Arylsulfatase A) ELISA Kit
Claudin 1 紧密连接蛋白1抗体秦皮乙素四甲基化铵四水合物Human ASGR2 (Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit
Claudin 3 紧密连接蛋白3抗体熊果四甲基化铵四水合物Human ASGR1 (Asialoglycoprotein Receptor 1) ELISA Kit
Claudin 4 紧密连接蛋白4抗体冰片四甲基化铵四水合物Human ASM (Acid Sphingomyelinase) ELISA Kit
Cortactin 皮层肌动蛋白抗体菝契皂苷元1-Boc-2-(氨甲基)吡咯烷Human MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit
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