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| 货号 | FS-01X98521 |
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中文名称：MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒
英文名称：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
产品规格：500次
货号：FS-01X98521
MTS是一种新型甲臜化合物，和MTT同属四唑氮衍生物。MTS能被活细胞里的线粒体脱氢酶降解而产生棕黄色水溶性的甲臜，通过测定甲臜的光谱吸收，进而可以测定细胞的增殖情况。
产品介绍:
| 产品特点： 1．本试剂盒是单溶液式细胞增殖与细胞毒性检测试剂，主要成分包含MTS和一个电子耦合试剂，溶液的稳定性强，反应的灵敏度高。 2．操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时，无需洗涤或收获细胞，免去溶解步骤。 3．无放射性。不需要配制液闪混合物，也不需要处理废弃物。 4．与MTT相比，使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。 5．操作灵活，与MTT不同，平板读数后可放回温箱继续孵育，使颜色进一步生成。 储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期半年。 使用效果： 96孔板中加入细胞100μL/孔(约1×104)，37℃，5% CO2细胞培养箱培养24小时，加入适当浓度的受试化合物。培养箱中孵育适当时间，每孔中加入10μL的MTS细胞增殖及毒性检测溶液。37℃孵育1-4小时。490nm波长检测光密度。 |
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
大肠杆菌显色培养基 E.Coli Chromogenic Medium 1000ml M58103 用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时，显兰色
9cm平皿 M58104
大肠菌群显色培养基 Coliform Chromogenic Medium 1000ml M58105 用于快速、准确检测大肠菌群大肠菌群培养24小时，显兰色
9cm平皿 M58106
大肠杆菌／大肠菌群显色培养基 E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 1000ml M58107 用于快速、准确同时检测大肠杆菌和大肠菌群，培养24小时，大肠杆菌显紫色,大肠菌群显红色
9cm平皿 M58108
TBX 培养基 TBX Agar 1000ml M58109 用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时，显兰色
9cm平皿 M58110
细菌总数显色培养基 Total Genes Chromogenic Medium 250g M58111 用于快速、准确检测细菌总数，培养24小时，细菌显红色
9cm平皿 M58112
O157显色培养基 O157 Chromogenic Medium 1000ml M58113 用于O157菌的显色培养
9cm平皿 M58114
沙门氏菌显色培养基 Salmonella Chromogenic Medium 1000ml M58115 用于沙门氏菌的显色培养
9cm平皿 M58116
李斯特氏菌显色培养基 Listera Chromogenic Medium 1000ml M58117 用于李斯特氏菌的显色培养
9cm平皿 M58118
金黄色葡萄球显色培养基 Staphylococcus Chromogenic Medium 1000ml M58119 用于的显色培养
9cm平皿 M58120
霉菌和酵母菌显色培养基 Mould and Yeast Chromogenic Medium 1000ml M58121 用于霉菌和酵母菌的显色培养
9cm平皿 M58122
弧菌显色培养基 Vibrio Chromogenic Medium 1000ml M58123 用于弧菌的显色培养，副溶血性弧菌显蓝色，其它弧菌显无色。
坂崎杆菌显色培养基 Enterobacter sakazakii Chromogenic Medium 1000ml M58124 用于坂崎杆菌的显色培养，坂崎杆菌显蓝色，其它肠杆菌显无色。
尿道定位显色培养基 Urine Orientation Chromogenic Medium 1000ml M58125 用于分离和鉴别常见尿道致病菌
麦康凯琼脂基础(SMAC) Sorbitol Maconkey Agar Base 250 M58126 用于大肠杆菌0157的分离培养(SN标准)
A 1.25μg/支*5 M58127 添加于100ml HB0121中
1%亚碲酸钾溶液 5ml*10 M58128 适量添加于HB0121
颗粒体蛋白(GRN)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Granulin (GRN) 96T Homo sapiens (Human)
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