过氧化氢酶（CAT）试剂盒的检测原理以及自备仪器

上海百蕊生物代理销售过氧化氢酶（CAT）试剂盒，现货供应，欢迎。

过氧化氢酶（CAT）试剂盒测定原理H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰，CAT 能够分解 H2O2，使反应溶液 240nm 下的吸光度随反 应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）、 研钵、冰和蒸馏水

试剂组成和配制：提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：液体 125μL×1 瓶，4℃保存。

1、细菌、细胞或组织样品的制备

收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液， 超声波破碎细菌或细胞(冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置 冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。

测定步骤：

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 240nm，蒸馏水调零。

2、CAT 检测工作液的配制：用时在试剂二中加入 25mL 试剂一，充分混匀，作为工作液。

3、测定前将 CAT 检测工作液在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上。

4、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本和 190μL 工作液，立即混匀并计时，记录

240nm 下初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2。计算 ΔA＝A1-A2。