人黑素瘤抑制性活性蛋白1（MIA1）ELISA试剂盒说明书 返回列表页

 采用进口抗体对国内包被，博研生物优势供应“人黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)ELISA试剂盒说明书”，保证质量，有任何质量问题或客户做不出实验结果均可免费退换，咨询：，添加客服:索取产品说明书。

产品名称:人黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)ELISA试剂盒说明书

货号：BYS104173B

我公司ELISA试剂盒服务标准：

1.有质量问题免费包换，合同上注明了的.（质量问题包括运输不当，客户在使用过程中测不出结果，等等！）
2.全程技术指导。（包括售前的标本收集，使用过程中不明白的地方，实验结束后的数据分析，有任何疑问，我们技术都会即时给你去电）
3.提供免费代测的服务。（你只需把标本寄过来，我们为你节省时间，帮你出结果，原始数据，分析数据均可提供，一般时间是5天左右）
4.客户有任何问题，我们都是在一个工作日之内给出解决方案。售后和技术这一块都是竭诚为客户服务。

人黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)ELISA试剂盒说明书ELISA试剂盒操作流程

前期准备工作：

实验前样本和试剂盒室温平行1小时，如果样本是冻存样本，应提前拿到2-8摄氏度进行解冻（不建议直接室温解冻）

准备好实验所需耗材，蒸馏水（去离子水）。

操作流程描叙：

将要进行实验的版孔进行设定好，标准品5个点，每个点设定平行，需要用到10个孔，空白只需1个孔。剩下孔可以做为样本孔
稀释标准，准备好5个EP管，然后在每个EP管中加入150微升标准稀释液，编上编码，分别为1，2，3，4,5，在1号管中加入150标准品，用枪头反复吹打10次左右（注意控制幅度不要过大容易产生气泡）如果有涡旋仪可以在涡旋仪上涡旋5秒左右，然后换枪头，在1号管中取150微升加入到2号管，后面过程一次类推。zui后稀释完，前面4个管中每管液体在150微升，5号管为300微升。浓度是从大到小。
标准、样本、空白加样：标准是每个浓度点2个孔（做平行），每孔加入50微升，加样过程中注意换枪头，样本孔中每孔加入50微升，加样过程中注意换枪头，空白孔加入50微升蒸馏水。特别要说明的是，标准加样和样本加样尽量控制在15分钟内加完，如果时间拖的太长，会导致前面孔先反应后面孔才开始反应，这样数值偏差过大。加完样后盖上封板膜，至37摄氏度孵育30分钟.
洗版，在孵育过程中可以将洗涤液配好，20ml30倍浓缩洗涤液用蒸馏水或者去离子水定容到600ml即可。每孔加入250-300微升的洗涤液（不要漫过版孔），（如果有震荡仪的话，可以讲板子放入震荡仪上5秒左右，然后静止三十秒，没有请忽略次过程）将板子在桌子上晃动5秒左右，然后静置30秒，甩干，拍板。说明：甩干过程尽量要快，1秒内就可以完成，不要慢慢倾斜倒掉液体，直接翻板甩掉液体即可。拍板过程需要在桌子上垫一层吸水纸或者滤纸，版孔朝下拍几下，拍干区别主要看吸水纸和滤纸上没有明显的水渍为完成。
每孔加入50微升的酶标试剂，此处在空白孔中不需要加（空白孔为空），孵育30分钟。
洗版同步骤4
显色，先每孔中加入50微升的显色A液，然后每孔中加入50微升显色B液。避光37摄氏度显色15分钟
终止，每孔加入50微升的终止液，注意，加完终止液必须在15分钟内读数，超过时间读数无效。在规定时间内读数都是有效的。

至此，整个实验结束

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操作注意事项：

1)试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。

3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4)使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6)洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7)底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

9)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

10)加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

11)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作

技术问答：

问：那标准品出现跳孔是怎么回事?

答：你*可以拿同样的标准品再重新做一次 ，做之前摇匀一下，肯定可以做好 。那是操作问题了 ，你可以再做一次的，之前也有客户出现过类似的问题 学生做了2次都没做好 后来老师自己做 就是摇匀了一下，其他操作都一样 标准曲线做的很*。

问：那我们算出来的ACH含量为什么出现负值?

答：说明个别样本的浓度很低，当浓度接近第6个点的时候 直线方程就有可能计算出负值

问：一个孔需要多少量的血清?

答：一个孔上样量10-50微升。