15min高产全血基因组DNA提取试剂盒 返回列表页

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

产品介绍：

15min高产全血基因组DNA提取试剂盒描述：该试剂盒采用的裂解液，可快速可靠的从抗凝全血样本中纯化出高纯度的基因组 DNA，最大限度的去除蛋白、色素、脂类等杂质污染。应用本试剂盒获取的 DNA纯度高，无抑制剂，A260/A280 为 1.6-1.9。应用本试剂盒提取的 DNA 可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern 杂交等多种分子生物学实验。

注意事项：
（1） 本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇，无需单独添加。
（2）gDNA LB1，储存时可能会有白色结晶沉淀，放置于56℃水浴锅溶解后，不影响使用效果。
（3）蛋白酶 K（20 mg/ml）长期保存请储存于-20℃，短期室温保存（6 个月），其它组分储存于室温。
（4）该试剂盒的保质期为 2 年。
操作方法
（1）样本处理（1.5 或 2 ml EP 管中处理）人抗凝全血：吸取 0.2~0.8 ml 抗凝全血加入到 800 μl 红细胞裂解液中上下颠倒混合均匀，13000rpm 离心 30s，去上清，留白细胞沉淀，用 50 μl 水重悬白细胞沉淀（有少量红细胞残留并不影响 DNA 的产量，如仍然有大量红细胞未裂解，可再次用红细胞裂解液将红细胞裂解）。淋巴细胞分离液分离出的白细胞：直接吸取 50~80 μl 白细胞。有核红细胞抗凝全血（禽血）：吸取 10 μl 抗凝全血加入到50 μl 无菌水中，漩涡震荡混合均匀。
（2）向上述准备好的样品溶液中加入 100 μl gDNA LB1 和20 μl 蛋白酶 K 漩涡混合均匀 10s，56℃水浴锅中消化5~30min（长时间消化可提高 DNA 的产量）。
（3）加入 700 μl gDNA BB2 漩涡震荡混合均匀 1min，肉眼观察有无未溶解的血凝块，如果无血凝块，则直接倒入到吸附柱中，13000rpm 离心 1min。注意：如果有未溶解的血凝块，则短离心去除血凝块后，再倒入到吸附柱中，进行后续离心操作。
（5）倒掉废液，向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer，13000rpm 离心 15s。重复此步骤一次。
（6）将吸附柱重新放回离心机，13000rpm 空离心 2min，将残留的乙醇甩干。
（7）将吸附柱芯放入到 1.5ml 收集管中，向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer（DNA Elution Buffer 预热到 65℃将提高洗脱产量），室温放置 1min，13,000rpm 离心1min，洗脱液即为基因组 DNA，冷冻保存。

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