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lambda(λ)DNA5μg说明书

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所  在  地上海

更新时间:2019-03-06 11:02:20浏览次数:235次

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产地 进口 加工定制
适用领域 科研
lambda(λ)DNA5μg说明书根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集细胞RNAwait的用量是1ml。

公司lambda(λ)DNA5μg说明书的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品:点击了解更克隆及表达
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
lambda(λ)DNA5μg说明书的详细介绍:

DNA提取流程图:
问:常用的DNA 浓度及纯度检测方法有哪些?
lambda(λ)DNA5μg说明书称答:回收得到的DNA段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。琼脂糖凝胶电泳通过对比定量的Marker 来定量浓度;紫外分光检测OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之间说明所得  DNA  纯度较好,如果洗脱时不使用溶液Eluent而使用去离子水,比值会偏低,因为pH 值和离子存在会影响光吸收值,但不表示纯度低。
问:长片段回收时应注意哪些问题?
答:lambda(λ)DNA5μg说明书当DNA 段长度较长(5   kb 以上)时,回收效率会有所下降,这是DNA 切胶回收时的常见现象。此时建议按以下方法解决问题:
    1 适当增加待回收DNA 样品的点样量;
    2 由于长段DNA 不易从树脂上洗脱下来,建议洗脱两次,可以提高洗脱效率;
    3 减少操作过程中对长段DNA 的物理损伤,如混合振荡操作不要过于剧烈,切胶时不要将DNA 长时间暴露在紫外等下。
注意事项:
● lambda(λ)DNA5μg说明书溶液PE *次使用前请按瓶上标签加入4 倍体积的无水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 无水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 无水乙醇,使用后立即盖紧盖子。
● 本产品对电泳使用的Agarose 种类没有严格限制,可以使用普通Agarose 。为了保证回收DNA 的质量和DNA 回收效率,希望使用高纯度的Agarose ,但没有必要一定要使用低熔点的Agarose 等。
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液,以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间,在条带分离清晰后进行切胶回收,以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率,切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小,或DNA 初始量少,回收率将会偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各种酶促反应等,不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率,请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的段。
● 请严格按照操作步骤操作。
4-羟基马拉维若 4-Hydroxyphenyl Maraviroc 856708-54-8 质量规格:美国进口

4'-羟基卡维地洛 4'-Hydroxyphenyl Carvedilol 142227-49-4 质量规格:美国进口

4--4'-羟基二醚(>95.0%(GC)) 4-Chloro-4'-hydroxydiphenyl Ether 21567-18-0 质量规格:>95.0%(GC)

4--1-萘酚(4C1N) 4-Chloro-1-naphthol (4-CN) 604-44-4 质量规格:0.99

4-氧基酚(>98%,BR) 4-Methoxyphenol 150-76-5 质量规格:>98%,BR

4-氧基-4'-基芪(>98.0%(GC)) 4-Methoxy-4'-nitrostilbene 1472-68-0 质量规格:>98.0%(GC)

4-氧基-17β-雌二醇 4-Methoxy-17β-estradiol 26788-23-8 质量规格:美国进口

4-氧基-13C,d3-雌激素酮 4-Methoxy-13C,d3-estrone 1217437-34-7 质量规格:美国进口

4-氧基-[13C,2H3]-雌激素酮 4-Methoxy-[13C,2H3]-estrone 58562-33-7 质量规格:美国进口

4'-酰并-18-冠-6-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether 60835-74-7 质量规格:>98.0%(GC)

4'-酰并-15-冠-5-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-15-crown 5-Ether 60835-73-6 质量规格:>98.0%(GC)

4-基伞形酯-N-酰-b-D-氨基半糖苷(>98%,BR) 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide 36476-29-6 质量规格:>98%,BR

4-基伞形酮酰-Β-D-吡喃葡糖酸苷 MU-GLU 18997-57-4 质量规格:>99%,分子生物学级

4-基伞形酮酰-beta-D-吡喃糖苷 MU-Gal 6160-78-7 质量规格:分子生物学级

4-基伞形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷 MU-alpha-GAL 38597-12-5 质量规格:分子生物学级

4-基伞形酮-β-D-木糖苷 4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews 6734-33-4 质量规格:0.99

4-基伞花基磷酸三水 MUP, disodium salt, trihydrate 22919-26-2 质量规格:>98%,分子生物学级

4-基-6,7-亚基二氧代(>99.0 %(GC)) 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin 15071-04-2 质量规格: >99.0 %(GC)

4-氨基安替比林(标准品) 4-(Methylamino)-antipyrine 519-98-2 质量规格:供检查用
lambda(λ)DNA5μg说明书5-Methyluridine规格:>99%,BR

5-Methylnicotinicacid规格:>98%

5-Methylindole规格:>98%,BR

5-methylcytosine规格:>98%,BR

5-Methyl-1,10-phenanthrolineHydrate规格:>98.0%(T)

5-Methoxypsoralen规格:GC≥98%,标准品

5-Isopropyl-2-methylphenol规格:供含量测定用

5-Iodo-Uridine规格:>99%,BR

5-Iodo-deoxyuridine规格:>98%,BR

5-Iodo-deoxycytidine规格:>98%,BR
实验步骤:
(1)lambda(λ)DNA5μg说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量

 

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