φX174RF Ⅱ DNA30μg说明书 返回列表页

公司φX174RF Ⅱ DNA30μg说明书的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品：点击了解更克隆及表达。
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
φX174RF Ⅱ DNA30μg说明书的详细介绍：

DNA提取流程图：
​问：常用的DNA 浓度及纯度检测方法有哪些？
φX174RF Ⅱ DNA30μg说明书称答：回收得到的DNA段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。琼脂糖凝胶电泳通过对比定量的Marker 来定量浓度；紫外分光检测OD260/280 比值，OD260/280 比值在1.7-1.9 之间说明所得  DNA  纯度较好，如果洗脱时不使用溶液Eluent而使用去离子水，比值会偏低，因为pH 值和离子存在会影响光吸收值，但不表示纯度低。
问：长片段回收时应注意哪些问题？
答：φX174RF Ⅱ DNA30μg说明书当DNA 段长度较长（5   kb 以上）时，回收效率会有所下降，这是DNA 切胶回收时的常见现象。此时建议按以下方法解决问题：
    1 适当增加待回收DNA 样品的点样量；
    2 由于长段DNA 不易从树脂上洗脱下来，建议洗脱两次，可以提高洗脱效率；
    3 减少操作过程中对长段DNA 的物理损伤，如混合振荡操作不要过于剧烈，切胶时不要将DNA 长时间暴露在紫外等下。
注意事项：
● φX174RF Ⅱ DNA30μg说明书溶液PE *次使用前请按瓶上标签加入4 倍体积的无水乙醇，即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 无水乙醇，20 ml 溶液PE 中加入80 ml 无水乙醇，使用后立即盖紧盖子。
● 本产品对电泳使用的Agarose 种类没有严格限制，可以使用普通Agarose 。为了保证回收DNA 的质量和DNA 回收效率，希望使用高纯度的Agarose ，但没有必要一定要使用低熔点的Agarose 等。
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液，以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间，在条带分离清晰后进行切胶回收，以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率，切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小，或DNA 初始量少，回收率将会偏低。
● 溶液Eluent（10 mM Tris-HCl, pH 8.5）中不含EDTA，其收集的DNA段可直接用于各种酶促反应等，不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率，请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的段。
● 请严格按照操作步骤操作。
4,4'-双(己氧基)氧化偶氮(>96.0%(N)) 4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene 2587-42-0 质量规格：>96.0%(N)

4,4'-双(5-基-2-并恶唑基)芪(升华提)(>96.0%(HPLC)) 4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation) 2397-00-4 质量规格：>96.0%(HPLC)

4,4'-二正辛氧基氧化偶氮(>95.0%(N)) 4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene 25729-12-8 质量规格：>95.0%(N)

4,4'-二基二醚(>99.0%(GC)) 4,4'-Dinitrodiphenyl Ether 101-63-3 质量规格：>99.0%(GC)

4,4'-二戊氧基氧化偶氮(>95.0%(N)) 4,4'-Diamyloxyazoxybenzene 19482-05-4 质量规格：>95.0%(N)

4,4'-二羧基二醚(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-Dicarboxydiphenyl Ether 2215-89-6 质量规格：>98.0%(GC)(T)

4,4'-二壬氧基氧化偶氮 4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene 25729-13-9 质量规格：

4,4'-二羟基二醚(>98.0%(GC)) 4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether 23994 质量规格：>98.0%(GC)

4,4'-二羟基二酮(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-Dihydroxybenzophenone 611-99-4 质量规格：>98.0%(GC)(T)

4,4-二羟基二砜(>98%,BR) 4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone 29465 质量规格：>98%,BR

4,4'-二二酮(>99.0%(GC)) 4,4'-Dichlorobenzophenone 90-98-2 质量规格：>99.0%(GC)

4,4'-二二砜(>98.0%(GC)) 4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone 29411 质量规格：>98.0%(GC)

4,4'-二氧基二酮(>99.0%(GC)) 4,4'-Dimethoxybenzophenone 90-96-0 质量规格：>99.0%(GC)

4,4'-二氟二酮(>99.0%(GC)) 4,4'-Difluorobenzophenone 345-92-6 质量规格：>99.0%(GC)

4,4'-二氧基氧化偶氮 4,4'-Dibutoxyazoxybenzene 17051-01-3 质量规格：

4,4'-二氨基二醚(ODA)(标准品) 4,4′-Diaminodiphenyl ether 101-80-4 质量规格：分析标准品

4,4'-二氨基二醚(标准品) 4,4'-Thiodianiline 139-65-1 质量规格：分析标准品

4,4'-二氨基二酮(>98.0%(T)) 4,4'-Diaminobenzophenone 611-98-3 质量规格：>98.0%(T)

4,4'-滴滴滴(标准品)  p, p’-DDD 72-54-8 质量规格：分析标准品
φX174RF Ⅱ DNA30μg说明书5-Fluoro-2'-deoxycytidine规格：98%,进分

5-Fluoro-1,3-dimethyluracil规格：美国进口

5'-Ethylcarboxamido-2',3'-isopropylideneAdenosine规格：美国进口

5-Desthiolyl-5-thioxoCefoperazone规格：美国进口

5-Desethyl5-CarboxyPioglitazone规格：美国进口

5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole规格：>98%，*

5-Chloro-1,10-phenanthroline规格：>98.0%(T)

5-ChloroHydrochlorothiazide规格：美国进口

5-Carboxy-X-rhodamine;5-ROX规格：>97%

5-CarboxyfluoresceinN-succinimidylester规格：0.9
实验步骤：
(1)φX174RF Ⅱ DNA30μg说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量