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产品名称:PON elisa试剂盒厂家
英文名称:PON elisa Kit
规格:48T/96T
保存: 2-8℃(频繁使用时);-20℃(长时间不用时)。
有效期: 6 个月(4℃);12 个月(-20℃)。
用途: 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
操作流程如下:
(1)仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
雷斯青霉AHI1 白血病相关蛋白AHI1抗体100 ug
锈赤蜡黄链霉菌AICDA 活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶抗体100 ul
亮陀螺炭球菌ALOXE3 表皮型脂氧合酶3抗体(鱼鳞病相关蛋白)20 ul
亮褐裸伞ALPK3 α蛋白激酶3抗体(心肌)100 ul
绒粘盖牛肝菌CEND1 细胞周期通道和神经细胞分化蛋白1抗体100 ul
褐革菌DHRS9 短链脱氢酶/还原酶家族9抗体100 ul
双核丝核菌DLL3 Notch信号通路Dta样配体3抗体100 ul
长柄链格孢EME1 减数分裂内切酶EME1抗体100 ul
三线镰刀菌FAM3C/ILEI 上皮分泌型FAM3C蛋白抗体100 ul
葡萄白腐菌FSTL5 卵泡抑素相关蛋白5抗体100 ul
落叶松木层孔菌Flightless 1 凝溶胶蛋白家族Fli-1抗体20 ul
青柄多孔菌GPSM1 G蛋白信号调节蛋白1抗体100 ul
鬼伞Intra Acrosomal Protein/SP10 顶端体蛋白10抗体100 ul
短芽孢杆菌KLHL8 Kch样蛋白8抗体100 ul
沙氏倚囊霉Iroquois homeobox protein 3 Irx3蛋白抗体100 ul
芬芳镰刀菌LHX6 转录因子LHX6抗体100µl
马勃MRP8+MRP14 多药耐药相关蛋白8/9/14抗体100 ul
费氏根瘤菌NEU4 神经氨酸酶4抗体100 ul
糖化血红蛋白(HbA1c)分析检测试剂盒试剂盒 Human HbA1c Kit 规格: 96T/48T
碳酸酐酶(CA)分析检测试剂盒 Human carbonic anhydrase Kit 规格: 96T/48T
肽盘生长因子(PLGF)分析检测试剂盒 Human Placenta Growth Factor,PIGF kit 规格: 96T/48T
髓样分化蛋白-2(MD2)分析检测试剂盒 Human MD2 Kit 规格: 96T/48T
髓磷脂碱蛋白(MBP)分析检测试剂盒 Huamn MBP Kit 规格: 96T/48T
酸性成纤维细胞生长因子(FGF1)分析检测试剂盒 Human Fibroblast growth factor acidic Kit 规格: 96T/48T
PON elisa试剂盒厂家Corynebacterium│ammoniagenes提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 肌苷酸(缺陷型)培养基: 0002生长条件: 30℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Micromonospora│sp.分离基物: 土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 双功能酶抑制剂培养基: CM0027生长条件: 28C存储条件: -80℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
Lactobacillus│hveticus提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 630生长条件: 40℃存储条件: 真空冷冻干燥法
Streptomyces│sp.提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0012生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;矿物油法;定期移植法
木霉种属: Trichoderma│sp.提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 产半纤维素酶培养基: 0014生长条件: 25-28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Candida│tropicalis分离基物: 哈密瓜提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 饲料用酶的筛选培养基: 0013生长条件: 25-28℃存储条件: -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法
Gibberla│zeae提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0014生长条件: 25℃
Micromonospora│sp.分离基物: 淤泥提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 抗细菌;抗枯草芽孢杆菌;抗金黄色葡萄球菌;具有免疫抑制的活性培养基: CM0012生长条件: 35-37C存储条件: 真空冷冻干燥
Streptomyces│sp.分离基物: 土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 活性物质;抗炎培养基: CM0038生长条件: 28C存储条件: -80℃冰箱冻结
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