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货号 | GOY-01X1364 |
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使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品名称 | 小鼠滑膜间充质干细胞 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
分类 | 原代细胞 |
货号 | GOY-01X1364 |
商品介绍:
名称 小鼠滑膜间充质干细胞 2.组织来源:滑膜组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠滑膜间充质干细胞分离自滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构,同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征,其病理改变累及关节的各个组成部分,但绝不仅局限于软骨,还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响,相互作用,共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的最大细胞群体,是维持关节正常功能的重要组织结构,它包埋在颗粒状无定性的基质中,基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。滑膜细胞主要功能:①滑膜细胞产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关;②滑膜细胞增生,表现为不依赖于支持物生长,并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏;③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。 5.方法简介: ()实验室分离的小鼠滑膜间充质干细胞采用胶原酶消化法和低密度接种法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的小鼠滑膜间充质干细胞经CD29、CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M236 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
1瓶 NCI-H23细胞株 NCI-H23 低温运输和保存
小肉汤培养基 the Smallest Broth Medium 250g
5g 金精三羧酸 ATA(Aurintricarboxylic Acid) 室温保存
1000mL Tris-Glycine-SDS Running Buffer,10X Tris-Glycine-SDS Running Buffer,10X 常温保存
50µg *热稳定单链结合蛋白 ET SSB -20℃保存
2 ug pBAD/gIII B pBAD/gIII
小鼠滑膜间充质干细胞远藤氏琼脂 英文名称:Endo Agar 产品规格:250g 小鼠白介素2(IL-2)免疫试剂盒进口、组装
乳糖蛋白胨半固体培养基 英文名称:Lactose Peptone Semisolid Medium 产品规格:250g 小鼠白介素1受体相关激1(IRAK1)免疫试剂盒进口、分装
胰蛋白胨水培养基 英文名称:Trytone Water medium 产品规格:250g 小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra/CD121)免疫试剂盒现货供应
动力-硝酸盐培养基(B法) 英文名称:Power - nitrate medium 产品规格:250g 小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)免疫试剂盒*直销
缓冲动力-硝酸盐培养基 英文名称:Buffered Power - nitrate medium 产品规格:250g 小鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)免疫试剂盒进口、组装
液体硫乙醇酸盐培养基(FT) 英文名称:Thiolglycollate Medium 产品规格:250g 小鼠白介素1β前体(pro-IL1B)免疫试剂盒进口、分装
脑-心浸萃琼脂培养基 英文名称:Brain-extracted agar Baptist Heart 产品规格:250g 小鼠白介素1β(IL-1β)免疫试剂盒现货供应
亮绿乳糖胆盐培养液(BGB) 英文名称:Brilliant Green Lactose Bile Broth 产品规格:250g 小鼠白介素1α(IL-1α)免疫试剂盒*直销
KF链球菌肉汤 英文名称:KF Streptococcus Broth 产品规格:100g 小鼠白介素18结合蛋白(IL-18BP)免疫试剂盒进口、组装
乳糖胆盐发酵培养基(高PH值) 英文名称:Lactose Bile Medium 产品规格:250g 小鼠白介素18(IL-18)免疫试剂盒进口、分装
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