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货号 | GOY-01S6640 |
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选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6640 |
商品介绍:
测定意义
LPS又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS广泛的存在于各种生物中。对于人来说,主要是胰脂肪酶,分解食物中脂肪形成单酰甘油和游离脂肪酸,被人体吸收并重新合成脂肪。外源性脂质摄入过多是引发肥胖的重要原因,血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。
测定原理
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。
实验中所需仪器和用品
甲苯、无水乙醇、研钵、冰、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪和双蒸水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
Candida sake乙酰CoA羧化检测试剂盒
Candida sake半乳糖凝集素8检测试剂盒
Pichia ohmeri粘蛋白1检测试剂盒
Pichia ohmeri粘蛋白2检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae热休克蛋白47检测试剂盒
Schizosaccharomyces pombeⅨ检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae消退素D检测试剂盒
Trichosporon cutaneum消退素E检测试剂盒
脂肪酶(LPS)可见分光光度法检测试剂盒A甙甜菊糖 97%sIL-2R 大鼠可溶性白介素-2受体猴载脂蛋白E(ApoE)联免疫吸附测定试剂盒
甜菊苷 80%IL-3 大鼠白介素-3猴抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)联免疫吸附测定试剂盒
烯酰, 96%,含~0.05% 噻吩稳定剂IL-4 大鼠白介素-4猴蛋白3抗体(PR3Ab)联免疫吸附测定试剂盒
正丁酰 98%IL-5 大鼠白介素-5猴肿瘤坏死因子配体相关分子-1A(TL1A)联免疫吸附测定试剂盒
2-酰 97%IL-6 ELISA KIT 大鼠白介素-6猴信号素7A(SEMA7A)联免疫吸附测定试剂盒
乙酰 CP,97%sIL-6R 大鼠可溶性白介素-6受体猴蛋白激Bγ(PKBG)联免疫吸附测定试剂盒
癸酰 98%IL-8 大鼠白介素-8猴脂氧素A4(LXA4)联免疫吸附测定试剂盒
庚酰 99%IL-10 ELISA KIT 大鼠白介素-10猴抗性(ACP5)联免疫吸附测定试剂盒
己酰 98%IL-11 大鼠白介素-11猴半凝集素3(GAL3)联免疫吸附测定试剂盒
烯酰 95%IL-12 大鼠白介素-12猴粘蛋白1(MUC1)联免疫吸附测定试剂盒
辛酰 99%IL-13 大鼠白介素-13猴封闭蛋白11(CLDN11)联免疫吸附测定试剂盒
三乙酰 98%IL-15 大鼠白介素-15猴表睾酮(ET)联免疫吸附测定试剂盒
特戊酰 98%IL-16 大鼠白介素-16猴胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)联免疫吸附测定试剂盒
正戊酰 98%IL-17 大鼠白介素-17猴β-微管蛋白(TUBβ)联免疫吸附测定试剂盒
2-氨-5-硝二酮 98%IL-18 大鼠白介素-18猴TATA框结合蛋白相关因子1(TAF1)联免疫吸附测定试剂盒
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