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货号 | GOY-01X1392 |
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产品名称 | 大鼠牙胚细胞 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
分类 | 原代细胞 |
货号 | GOY-01X1392 |
商品介绍:
名称 大鼠牙胚细胞 2.组织来源:牙胚组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠牙胚细胞分离自牙胚组织;牙胚是牙齿最开始发育阶段的形态,是由牙板向深层的结缔组织内伸延,在其最末端细胞增生,进一步发育成牙胚。牙胚有三部分组成:①成釉器(enamel organ),起源于口腔外胚层,形成釉质;②牙乳头(dental papilla),起源于外胚层间充质,形成牙髓和牙本质;③牙囊(dental sac),起源于外胚层间充质,形成牙骨质、牙周膜和固有牙槽骨。牙胚的发生是口腔上皮和外胚间充质相互作用的结果。在胚胎的第5周,覆盖在原口腔的上皮由两层细胞组成,外层是扁平上皮细胞,内层为矮柱状的基底细胞。在未来的牙槽突区,深层的外胚层间充组织诱导上皮增生,开始仅在上下颌弓的特定点上,上皮局部增生,很快增厚的上皮相互连接,依照颌骨的外形形成一马蹄形上皮带,称为原发性上皮带。在胚胎的第7周,这一上皮带继续向深层生长,并分裂为两个:向颊(唇)方向生长的上皮板称前庭板,位于舌(腭)侧的上皮板称为牙板(dental lamina)。在胚胎的第8~10周,前庭板继续向深层生长,与发育的牙槽嵴分开,前庭板表面上皮变性,形成口腔前庭沟。 5.方法简介: ()实验室分离的大鼠牙胚细胞采用胶原酶消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的大鼠牙胚细胞经检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R305 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传3代左右 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
100uL 植物gamma-TIP PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
2 ug pMIB V5-His B pMIB V5-His B 低温运输,-20℃保存
月示蛋白胨 Proteose Peptone 250g
1瓶 SK-LU-1 [SKLU-1;SKLU1]细胞株 SK-LU-1 [SKLU-1;SKLU1] 低温运输和保存
10mL 超级杂交液(芯片) SuperHyb Solution for Chip -20℃保存
100g 9,10- 二甲基 -1,2 苯并蒽
大鼠牙胚细胞HBI志贺氏菌生化鉴定条(GB) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子硬骨素(SOST)免疫试剂盒现货供应
HBI变形杆菌生化鉴定条(GB) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子胰高血糖素(GC)免疫试剂盒*直销
HBI单增李斯特氏菌生化鉴定条(SN) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子胰岛素样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒进口、组装
HBI单增李斯特氏菌生化鉴定条(GB) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒进口、分装
HBI霍乱弧菌生化鉴定条(SN) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子胰岛素(INS)免疫试剂盒现货供应
HBI肠杆菌科细菌生化鉴定条(GB) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫试剂盒*直销
HBI阪崎肠杆菌生化鉴定条(GB) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫试剂盒进口、组装
HBI创伤弧菌生化鉴定条(GB) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)免疫试剂盒进口、分装
HBI乳酸菌生化鉴定条(GB) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)免疫试剂盒现货供应
HBI副溶血性弧菌生化鉴定条(新国标) 英文名称: 产品规格:5条/盒 兔子血小板活化因子(PAF)免疫试剂盒*直销
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