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大鼠神经少突胶质前体细胞

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更新时间:2022-05-23 15:21:31浏览次数:125次

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科研菌种
生化检测试剂盒
科研细胞
货号 GOY-01X1397
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去甲氧基姜黄素 22608-11-3 规格: 20mg 订购|咨询

产品属性:

产品名称

规格

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货号

大鼠神经少突胶质前体细胞

5×10⁵Cells/T25培养瓶

原代细胞

GOY-01X1397

产品介绍:

名称    大鼠神经少突胶质前体细胞

2.组织来源:脑组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠神经少突胶质前体细胞分离自脑皮层组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。少突胶质细胞分布于中枢神经系统,在银浸染标本中,少突胶质细胞比星状胶质细胞小,其突起也较小而少,呈珠状,故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。少突胶质细胞(oligodendrocyte)是中枢神经系统(CNS)的成髓鞘神经胶质细胞,其发育要经历少突胶质细胞祖细胞、前少突胶质细胞祖细胞、未成熟和成熟少突胶质细胞等阶段。有学者将少突胶质细胞按其发育程度和形态分为三型。但是,细胞发育是一个连续的过程,其形态、表达产物和功能的演变没有严格的界限,因此,其分类是相对的。这三型分别为:Ⅰ型少突胶质细胞又称前O2A(pre-O2A progenitor cell)。细胞呈圆形,表面光滑,直径约3μm,体外混合培养时成簇生长在星形胶质表面,具有很强的分裂增殖潜力,表达GM1、波形蛋白和多唾液酸—神经粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)等。Ⅱ型少突胶质细胞胞体常有双极或三极突起,极少数为单极突起,直径约7μm,有一定的分裂增殖能力。体外培养时为双潜能细胞,既可分化为少突胶质细胞又可分化为Ⅱ型星形胶质,故又称为少突胶质细胞-Ⅱ型星形胶质祖细胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell,O2A)。O2A除表达GM1和波形蛋白外还表达GD3和GQ(淋巴杂交瘤株A2B5产生GQ的抗体),故常用A2B5抗体标记O2A。Ⅲ型少突胶质细胞不再具有分裂增殖能力,为分裂终期细胞。直径约10μm。根据其形成髓鞘的能力,又分为不成熟的和成熟的两类少突胶质细胞。不成熟的OL胞体常伸出4~5条较粗大突起,表面还残留有A2B5标记物,同时也表达O1-O4抗原,无形成髓鞘的能力。成熟的少突胶质细胞突起有如蜘蛛网,大量表达半乳糖脑苷脂(galactocerebro side,GC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein,PLP)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)等,有对轴突髓鞘化的能力。体外培养的少突胶质细胞前体细胞(简称少突胶质细胞前体细胞)包括前O2A和O2A和未成熟少突胶质细胞,前两者具有增殖能力。

5.方法简介:

()实验室分离的大鼠神经少突胶质细胞采用消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶

6.质量检测:

()实验室分离的大鼠神经少突胶质前体细胞经A2B5免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

包被条件PLL(0.1mg/ml)

培养基含B-27、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-R308

换液频率每2-3天换液一次;

生长特性贴壁

细胞形态双极、多极形

传代特性不传代,不增殖,存活1-2周

消化液0.25%

培养条件气相:空气,95%;CO2,5%

处理方法:

收到细胞后,检查外包装是否完整,细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题,请即时联系。并进行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。

3. 预热培养基(含10%胎牛血清,1%双抗)。

4. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)。

5. ①若细胞密度较小,无菌操作,去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上,进行传代。88.jpg

实验操作步骤:  

a.采用认可的方案处死啮齿动物。

b.立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。

c.用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。

d.用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宫,置于无菌的培养皿上。

e.剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。

f.漂洗胚胎,去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。

注意事项:

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,

避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗

并*清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

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细胞AURORA-B激酶活性

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细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;

适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

 


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