当前位置:上海谷研实业有限公司>>科研细胞>>原代红胞>> 小鼠牙龈成纤维细胞
货号 | GOY-01X1400 |
---|
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品名称 | 小鼠牙龈成纤维细胞 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
分类 | 原代细胞 |
货号 | GOY-01X1400 |
商品介绍:
名称 小鼠牙龈成纤维细胞 2.组织来源:牙龈组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠牙龈成纤维细胞分离自牙龈组织;牙龈是附着在牙颈和牙槽突部分的粘膜组织,呈粉红色、有光泽、质坚韧。牙龈边缘称为龈缘,正常呈月芽形。龈缘与牙颈之间的小沟称龈沟。两邻牙之间的牙龈突起称龈乳突。也叫齿龈,通称牙床;是指包住齿颈的黏膜组织,粉红色,内有很多血管和神经。牙龈表面为复层鳞状上皮,有角化层或不全角化层。上皮钉较长,伸入结缔组织。牙龈上皮不仅覆盖牙龈外露部分,而且也转向内侧,覆盖龈沟壁称为沟内上皮;一部分附着在牙体上称为结合上皮。牙龈的固有层为各种方向交织的结缔组织纤维束,其中最主要的成分是胶原纤维,它占全部结缔组织56%。牙龈中为数最多的细胞为成纤维细胞,肥大细胞也常在牙龈中出现,此外还有淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞。 5.方法简介: ()实验室分离的小鼠牙龈成纤维细胞采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的小鼠牙龈成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M310 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传1-3代左右 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
罗汉果黄素 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;10mg 化核纤层蛋白A/C抗体 FBXO32 ELISA Kit F-框蛋白32(FBXO32)ELISA试剂盒
规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人周期素依赖性激2C(CDKN2C)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠催产素(OT)ELISA试剂盒,英文名:OT ELISA Kit
盐柔红(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Daunorubicin HCl 足突蛋白(PDCN)重组蛋白英文名称:Recom
小鼠牙龈成纤维细胞Tergitol-7 琼脂进口、国产Tergitol-7 Agar用于大肠菌群的鉴定(NMKL)250兔子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫试剂盒现货供应
TTC 溶液(0.125%)进口、国产TTC Solution(0.125%)添加于HB0127中2ml*10兔子紧密连接蛋白1(ZO1)免疫试剂盒*直销
标准I号营养琼脂进口、国产Standard I Nutrient Agar标准细菌计数、含糖(MERCK方法)250兔子金属硫蛋白2(MT-2)免疫试剂盒进口、组装
标准II号营养琼脂进口、国产Standard II Nutrient Agar细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用(MERCK方法)250兔子结缔组织生长因子(CTGF)免疫试剂盒进口、分装
A1 培养基进口、国产A1 Medium用于检测水中的大肠菌群(US-EPA标准)250兔子窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫试剂盒现货供应
胰胨大豆胨固绿琼脂进口、国产Tryptic Soy Fast Green Agar用于滤膜细菌总数的测定和分离培养(NEOGEN方法)250兔子胶原II(Collagenase II)免疫试剂盒*直销
LES Endo 琼脂进口、国产m-Endo Agar,LES用于滤膜细菌计数(Merck方法)250g兔子胶原I(Collagenase I)免疫试剂盒进口、组装
m-TGE 肉汤进口、国产m-TGE Broth用于奶制品中滤膜细菌计数(Acumedia方法)250兔子降钙素(CT)免疫试剂盒进口、分装
m-TEC琼脂进口、国产m-TEC Agar用于水中耐热细菌滤膜计数(Acumedia方法)250兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)免疫试剂盒现货供应
现隐肉汤进口、国产Presence Absence Broth用于水中大肠菌群计数(US-EPA方法)250兔子甲状腺素(T4)免疫试剂盒*直销
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,仪表网对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。