交链孢霉属通用探针法荧光PCR检测试剂盒样品RNA的抽提

交链孢霉属通用探针法荧光PCR检测试剂盒样品RNA的抽提：

①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。

④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。

2 RNA质量检测

1）紫外吸收法测定

先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。

① 浓度测定

A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。

phospho-APBB1 (Ser175)磷酸化铁蛋白Fe65抗体

phospho-APBB1 (Ser347)磷酸化铁蛋白Fe65抗体

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体

phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser730)磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体

phospho-ATF2 (Ser322)磷酸化活化复制因子2抗体

phospho-ATF2 (Thr51)磷酸化活化复制因子2抗体

phospho-APC1 (Ser377)磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体

ASAP1发育分化增强因子1抗体

phospho-ASAP1 (Tyr782)磷酸化发育分化增强因子1抗体

AKT3蛋白激酶B3

Girdin肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体

AKAP2蛋白激酶A2抗体

AT2R2血管紧张素Ⅱ受体2抗体

ASH1LASH1蛋白抗体

AADACL2芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白2抗体

AAMP血管内皮细胞迁移蛋白抗体

AKR1B10醛糖还原酶相关蛋白质抗体

AKR1C2胆汁酸结合蛋白DDH2抗体

ANGPTL3血管生成素样蛋白3抗体

Acylglycerol Kinase甘油酯激酶线粒体抗体

phospho-alpha Adducin(Ser726)磷酸化内收蛋白a1抗体

ATG16L2自噬体ATG16L2蛋白抗体