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参数规格:
产品名称:牛棒杆菌PCR试剂盒
产品分类:荧光定量PCR
货号:CP100963
产品规格:50次
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
西罗莫司脂化物质量规格:美国进口Temsirolimus CLIAKitforVEGFR-1/Flt1ELISAKit大鼠血管内皮细胞生长因子受体1规格:48T/96T 大鼠腺苷受体A2a(ADORA2A)ELISA试剂盒 ,英文名: ADORA2A ELISA Kit
佐他莫司质量规格:美国进口Zotarolimus 细胞化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒(含AP一抗)10 人单疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)ELISA检测试剂盒HumanHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISAKit 96T/48T
雷沙吉兰质量规格:美国进口Rasagiline ELISAKitHSPG人肝素糖蛋白规格:48T/96T 大鼠8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)试剂盒 Rat 8-iso prostaglandin F2α,8-iso-PGF2a ELISA Kit
雷尼替丁S-氧化物质量规格:美国进口Ranitidine S-Oxide 小鼠DNA损伤诱导转录因子3(DDIT3)ELISA试剂盒 ,英文名: DDIT3 ELISA Kit CLIAKitforsCD30L(MouseSolubleClusterofdiffereiation30ligand)ELISAKit小鼠可溶性CD30配体规格:48T/96T
曙红Y(水溶)质量规格:BSEosin Y water solution ELISAKitICAM-2/CD102人细胞间粘附分子2规格:48T/96T 母亲DPP同源物4(Smad 4)ELISA试剂盒 ,英文名: Smad 4 ELISA Kit
偶氮胭脂红B质量规格:INDAzocarmine B 小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒 ,英文名: sIgA ELISA Kit Ratacetylcholine,ACHELISA试剂盒大鼠乙酰胆碱(Ach)ELISA试剂盒规格:96T/48T
偶氮胭脂红G质量规格:BSAzocarmine G 大鼠酶2(CA-2)ELISA检测试剂盒Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 96T/48T HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISA试剂盒人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
皮质甾酮(标准品)质量规格:HPLC>97.0%,标准品Corticosterone 人白介素23受体(IL-23R)试剂盒 Human IL-23R ELISA Kit Humandecay-acceleratingfactor,DAFELISAKit人降解加速因子(DAF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
牛棒杆菌PCR试剂盒血吸虫荧光PCR法检测试剂盒
传染性法氏囊病病毒荧光PCR法检测试剂盒
禽白血病病毒荧光PCR法检测试剂盒
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
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