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参数规格:
产品名称:RNA级糖原溶液
产品分类:RNA/DNA提取试剂盒
货号:CP100862
产品规格:详见说明
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
1M DTT1ml3-Amino-methoxybenzanilide153-氨基-甲酰苯胺
1M Tris pH6.ml3-Amino-methoxybenzamide1748173-氨基-甲酰胺
1M Tris pH7.00ml3'-Amino'-methoxyacetanilide637573'-氨基'-甲氧基
1M Tris pH7.ml3-Amino-hydroxybenzoic acid157123-氨基-羟基苯甲酸
1M Tris pH8.00ml3-Amino-phenylpropionic acid6149C9H11NO2
虾特定基因序列(FC)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Aspergillon A 2239299-08-0 中文名: 分子式:C22H32O 度:98.0% 关键词:
虾特定基因序列(FC)核酸检测试剂盒 48T Aspergillon A 2239299-08-0 中文名: 分子式:C22H32O
虾胺/酚 英文名称: Octopamine 规格: 48T/96T 英文缩写: OPM Aspartame 22839-47-0 中文名:阿司帕坦 分子式:C14H18N2O5 度:98.0% 关键词:
细小病毒(PPV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Artesunate 88495-63-0 中文名:青蒿琥酯 分子式:C19H28O8 度:98.0% 关键词:
细小病毒(PPV)核酸检测试剂盒 48T Artesunate 88495-63-0 中文名:青蒿琥酯 分子式:C19H28O8
RNA级糖原溶液氢二钠七水 phosphate, dibasic, heptahydrate 质量规格:>98%,BR MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISA试剂盒小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
dATP溶液(100 mM) dATP 100 mM solution 质量规格:>97%,BR 小鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA 试剂盒
癸酸钠 decanoate 质量规格:>99%,进分 Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒
琼脂糖(美仑电泳级) Agarose 质量规格:美仑,电泳级 Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
琼脂糖(Sigma) Agarose 质量规格:Sigma原装 Human1,25-dihydroxyvitaminD3,DVD/DHVD3ELISA试剂盒人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物血凝素 Phytohemagglutinin 质量规格:BR 真菌/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂盒10/20
6-糠基氨基嘌呤,激动素 Kinetin,6-Furfurylaminopurine 质量规格:>98%,BR MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit小鼠B细胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸 EGTA, egtazic acid 质量规格:>98%,分子生物学级 小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)ELISA试剂盒 ,英文名: MDH ELISA Kit
无水二氢钠(分子生物学级) phosphate, monobasic, anhydrous 质量规格:>98.5%,分子生物学级 小鼠白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T
月桂酰基肌氨酸钠(分子生物学级) lauroyl sarcosine 质量规格:>95%,分子生物学级 人分泌粒蛋白1(嗜铬粒蛋白B)(CHGB/SCG1)试剂盒 Human CHGB/SCG1 ELISA kit
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
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