当前位置:上海莼试生物技术有限公司>>PCR检测试剂盒>>RNA/DNA提取>> 非冻型细菌RNA保存夜
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
参数规格:
产品名称:非冻型细菌RNA保存夜
产品分类:RNA/DNA提取试剂盒
货号:CP100603
产品规格:详见说明
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
(NL63)单重荧光PCR检测试剂盒48Estradiol hexahydrobenzoate1517环己甲酸雌二醇
(229E)单重荧光PCR检测试剂盒48Estradiol heptanoate49567庚酸雌二醇
博卡病毒(HBocaV)单重荧光PCR检测试剂盒48Estradiol valerate9792戊酸雌二醇
偏肺病毒(HMPV)单重荧光PCR检测试剂盒48Cyproterone acetate4271醋酸环丙氯地孕酮
腺病毒(ADV)单重荧光PCR检测试剂盒48Megestrol acetate5953醋酸甲地孕酮
小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒 Glycerol 56-81-5 中文名:甘油 分子式:C3H8O3
小鼠全段甲状旁腺素elisa试剂盒 小鼠全段甲状旁腺素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠全段甲状旁腺素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠全段甲状旁腺素试剂盒、小鼠全段甲状旁腺素elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Glyceryl hexacosanoate 127098-14-0 中文名: 分子式:C29H58O4
小鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒 Glyburide 中文名:格列本脲 分子式:C23H28ClN3O5S 度:98.0%
小鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISAKit Fenofibric acid 42017-89-0 中文名:非诺贝特酸 分子式:C17H15ClO4
小鼠去甲上腺素(NE)ELISA试剂盒 Glyburide 中文名:格列本脲 分子式:C23H28ClN3O5S
非冻型细菌RNA保存夜杨梅醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA 试剂盒
杨梅酮 HPLC≥98% 5mg Rat ulasensitive thyroid stimulating hormone (U-TSH) ELISA Kit 大鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒
洋椿苦素 HPLC≥98% 5mg HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit 人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
洋紫苏醇B HPLC≥98% 5mg ChickenAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA试剂盒鸡抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
野甘草属醇 HPLC≥98% 5mg 载玻片细胞BAD蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
野黑樱苷 HPLC≥98% 20mg MouseHistamine,HISELISAKit小鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
野黑樱苷 HPLC≥98% 5mg 小鼠锌指同源框蛋白1B(ZFHX1B)ELISA试剂盒 ,英文名: ZFHX1B ELISA Kit
叶含乙酰瘿花香茶菜素 A HPLC≥98% 5mg 兔子坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒rabbitTumornecrosisfactorα,TNFαELISAKit 96T/48T
叶含乙酰瘿花香茶菜素 B HPLC≥98% 5mg 牛转录因子P65(RELA)试剂盒 Bovine anscription factor p65,RELA ELISA kit
叶下珠脂素 HPLC≥98% 5mg 英文名称HumanFIXELISAKit人凝血因子IX规格:96T/48T
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