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大耳山羊皮肤细胞;LDG-3说明书

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更新时间:2017-05-29 08:54:22浏览次数:161次

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细胞名称     大耳山羊皮肤细胞;LDG-3说明书
形态特性      成纤维细胞样
生长特性     贴壁生长
特征特性      该细胞系来源于一雄性大耳山羊的皮肤组织。1990年由中国科学院昆明细胞库建立。 
培养条件      M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS
传代方法      1:2;3-4天一次
传代情况     P5
冻存条件      基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测     荧光法(-)
STR      -
同工酶     
染色体     
使用权限     A类
大耳山羊皮肤细胞;LDG-3说明书细胞培养
1、冷冻管应如何解冻?
取出冷冻管后, 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻, 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时, 必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。
2、细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO?
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3、可否使用与原先培养条件不同之培养基?
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基, 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基, 细胞大都无法立即适应, 造成细胞无法存活。
4、可否使用与原先培养条件不同之血清种类?
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源, 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清, 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
大耳山羊皮肤细胞;LDG-3说明书复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过Z易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
Ectodysplasin-A; EDA protein homolog; Tabby protein; Ectodysplasin-A, membrane form; secreted form EDA-A5.
Function : Seems to be involved in epithelial-mesenchymal signaling during morphogenesis of ectodermal organs. Isoform 1 binds only to the receptor EDAR, while isoform 3 binds exclusively to the receptor XEDAR.
Subunit : Homotrimer. The homotrimers may then dimerize and form higher-order oligomers.
Subcellular Location : Cell membrane; Single-pass type II membrane protein.
Ectodysplasin-A, secreted form: Secreted.
Tissue Specificity : Not abundant; expressed in specific cell types of ectodermal (but not mesodermal) origin of keratinocytes, hair follicles, sweat glands. Also in adult heart, liver, muscle, pancreas, prostate, fetal liver, uterus, small intestine and umbilical chord.
Post-translational modifications : N-glycosylated.
Processing by furin produces a secreted form.

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