简介薄层色谱扫描仪的发展历程

    薄层色谱扫描仪的应用范围非常广泛，薄层色谱（TLC）是色谱技术的一种：将固定相涂布于玻璃板上或铝板上，成一均匀薄层，样品中各组分随流动相在薄层中定向移动，不同组分和固定性/流动相的作用力不同而实现了分离。

 

    薄层色谱(TLC)是一种非常有用的跟踪反应的手段，还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶，它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。流动相则是一种极性待选的溶剂。

 

    在5.301中以及大多数实验室实验中，都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上，然后利用毛细作用使溶剂(或混合溶剂)沿板向上移动进行展开。根据混合物中组分的极性，不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。

 

    极性强的化合物会“粘”在极性的硅胶上，在薄板上移动的距离比较短。而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保留较长的时间从而在板上移动较大的距离。化合物移动的距离大小用Rf值来表达。这是一个位于0～1之间的数值，它的定义为：化合物距离基线(点样时已经确定)的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。

 

    一、薄层色谱技术的特点

 

    薄层色谱技术具有其他色谱技术共同的特征，即利用样品中各组成成分的不同物理特性把它们分离开来。这些物理特性包括分子大小、形状、所带电荷、挥发性、溶解性及吸附性等。

 

    1.薄层色谱系统的组成部分

 

    固定相：可以是一种固体、凝胶或固定化的液体，或起支撑作用的基质。

 

    色谱板：把固定相薄薄涂布在玻璃或塑料板上。

 

    流动相：又称展开剂，起溶剂作用的液体，用于协助样品在固定相表面以不同速度进行迁移。

 

    运送系统：用来促使流动相通过色谱床。薄层色谱的运送过程是借助毛细管作用、压力或者离心力等设备。

 

    检测系统：用于检测所分离的物质。

 

    2.薄层色谱技术的特点

 

    ①色谱系统所用器材简单，价格低廉，操作技术易学，容易在一般实验室推广。

 

    ②不受样品种类的限制，适用范围较广。不仅可用于复杂成分的分离，还可用于未知成分的分离和检测。并且检测可用的手段选择性多，较为方便。

 

    ③具有多路柱效应，可同时进行多个样品的分离，且灵敏度高、检测速度快。

 

    ④样品前处理比较简单，精度要求不高，还可直接用样品的粗提物点样。实验时溶剂用量少，更换容易，实验成本较低。

 

    ⑤在获得典型色谱图后，既可以直接扫描进行测定，也可通过彩色摄影制成彩色图谱或利用计算机图像处理系统进行处理后作为规范文件保存。

 

    二、薄层色谱技术发展演变历程

 

    薄层色谱法是20世纪50年代从经典柱色谱法及纸色谱法的基础上发展起来的一种色谱技术。进入20世纪60年代后，人们对薄层色谱法在使用器材的不断改进、操作技术水平的不断提高等方面进行了大量的工作，如薄层板的制备和点样装置的从手工逐步过渡到自动，从人工控制到机械化自动控制，使薄层色谱法的操作精度日益提高，因而也就为该项技术在中药及其制剂中各类化学物质的定性与定量分析中的广泛应用提供了技术支持条件。

 

    特别是在近20年来，随着计算机技术的不断渗透，人们对薄层色谱法在缩短分离时间、提高分离效率、提高检测灵敏度、保证定量精度及扩大应用范围等方面不断进行研究，使该方法不仅在仪器设备上不断完善，而且在技术水平上取得了突破性进展。主要有以下几个方面的突出表现。

 

    方面，薄层色谱与其他分离分析技术联用，更加拓宽了薄层色谱技术的适用范围。比如，与其他色谱法联用从而产生了薄层色谱与高效液相色谱法联用、薄层色谱与气相色谱联用、HPLC-GC/MS-TLC联用、高速反流色谱与薄层色谱联用等技术。这些联用技术有效地解决了一些组成复杂而含量又极微的化学成分分离的技术难题。

 

    第二方面，薄层色谱与其他分析检测仪的联用，增加了分析检测的准确性和精密度。这样不仅可以强化其定性的功能，而且还可以对样品中被分离的一种或多种成分进行在线联用定量分析，这与以往将斑点从薄层上刮下后再与各种光谱联用相比，其准确性和精密度都有显著提高。

 

    比如，薄层色谱--紫外可见光谱扫描仪(如CamagII型薄层扫描仪/HP300计算机系统)，在光源允许的范围内，可选择多达9种波长，依次自动扫描，从而获得三维光谱的薄层色谱图，人们可以利用不同颜色绘制的三维图，直观地看到各组分在不同波长的吸光强度及其变化情况，选定波长时同时扫描测定样品中各成分的含量。

 

    此外，还有薄层色谱法与光谱法联用而产生的薄层色谱与原子吸收光谱联用、薄层色谱与红外光谱联用、薄层色谱与拉曼光谱联用、薄层色谱与光声光谱联用、薄层色谱与质谱联用、薄层色谱与核磁共振联用和薄层色谱与数字自动化放射自显影联用等技术。通过这些技术的联用，人们可以获取丰富的被测化合物的结构信息，也使薄层色谱的定性功能得到了进一步的加强。

 

    类似这样的联用技术还包括与电化学法联用而出现的薄层色谱法与方波阳极伏安法联用、薄层色谱法与脉冲极谱法联用、薄层色谱与库仑滴定法联用等技术，它们在解决复杂的中药化学成分检测的问题方面均获得了满意的结果。

 

    第三方面，薄层色谱照相技术是近几年发展起来的一项摄影技术，主要是对经过色谱的薄层板，在灯光(日光)或一定波长的紫外光下，将可见光或荧光斑点完整地以照片形式记录下来，从而得到一张性的薄层色谱图，它记录了薄层色谱的所有信息。近年来利用数码技术直接将图像信息输入计算机内进行储存和打印，不仅提高了薄层图像的质量，而且还保证了薄层色谱数据资料的规范性。