脑动脉血管内皮细胞公司正在出售的产品：平板计数琼脂 高营养培养基，用于分离、计数异养或“富营养”的细，水、废水、食品、乳制品的细计数500g
缓冲蛋白胨水 (CM0509) Oxoid
定位显色培养基 用于尿道细分离和鉴别，也可用于伤口感染标本的病原分离1000ml
BL琼脂培养基 250(g)
乳糖胆盐发酵培养基 250(g)
紫色麦康凯肉汤 (US 配方) (C
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产品名称 | 脑动脉血管内皮细胞 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
分类 | 原代细胞 |
货号 | GOY-01X1050 |
商品介绍：
名称 脑动脉血管内皮细胞 2.组织来源：脑动脉组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 人脑动脉血管内皮细胞分离自脑动脉组织；脑动脉有成对的颈内动脉和椎动脉互相衔接成动脉循环；静脉系多不与同名动脉拌行，所收集的静脉血先进入静脉窦再汇入颈内静脉；各级静脉都没有瓣膜，它包括脑的动脉系统和脑的静脉系统。脑动脉血管内皮细胞主要功能：①维持血管内外的动态平衡；②合成和分泌细胞因子和介质；③维持凝血和纤溶的动态平衡。 5.方法简介： ()实验室分离的人脑动脉血管内皮细胞采用胶原酶-中性混合消化法并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： ()实验室分离的人脑动脉血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H115 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态内皮细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25% 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的*培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞*贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
猪胆粉 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Caspase-3
1瓶 Sp2/0-Ag14细胞株 Sp2/0-Ag14 低温运输和保存 15.6-1000 pg/mL 蓝舌病病毒(BTV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
尿素琼脂（PH7.2） Urease Agar Base 250g 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Dickkopf-related protein 3
10L DMEM( 高糖 ) DMEM(High
脑动脉血管内皮细胞1瓶 97-L细胞株 97-L 低温运输和保存
100mL Transformation Buffer-1 Transformation Buffer-1 常温保存
100g 电泳级尿素 Urea，EG 常温
2 ug pBudCE4.1 pBudCE4.1 低温运输，-20℃保存
1个 杂交管(35×100mm) Hybridization Tube 常温
1mg 重组蛋白L Recombinant Protein L -20℃保存
2 ug pIEXBac-c-EGFP-4 pIEXBac-c-EGFP-4 低温运输，-20℃保存
高盐察氏琼脂 Salt Czapek Dox Agar 250g
SDF4 基质细胞衍生因子4抗体（钙结合蛋白） 规格: 0.2ml
TNFRSF13B 瘤坏死因子受体超家族成员13B抗体 规格: 0.2ml14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon) 14-3-3蛋白抗体 0.1ml
OTC 氨基甲酰转移抗体 规格: 0.1ml
phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 磷酸化细丝蛋白A抗体 规格: 0.1ml
