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小鼠视网膜色素上皮细胞

参考价
面议
具体成交价以合同协议为准
  • 型号
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新时间2022-05-19
  • 厂商性质经销商
  • 入驻年限9
  • 实名认证已认证
  • 产品数量9963
  • 人气值265853
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上海谷研实业有限公司主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的销售,主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司产品。    


公司客户遍布大学、研究所、医院、卫生、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。


公司主推品牌: (进口、国产) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。




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货号GOY-01X1054
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小鼠视网膜色素上皮细胞 产品详情

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称

小鼠视网膜色素上皮细胞

规格

5×10⁵Cells/T25培养瓶

分类

原代细胞

货号

GOY-01X1054

商品介绍:

名称 小鼠视网膜色素上皮细胞

2.组织来源:视网膜组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

小鼠视网膜色素上皮细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力*。视网膜色素上皮(RPE)位于脉络膜和光感受器细胞外节之间,是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道;主要是由单层色素上皮细胞所构成,排列十分规则。视网膜色素上皮参与循环,吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性,并分泌多种生长因子,帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。细胞呈多角形,细胞分为三部分,即顶部、体部和基底部。视网膜色素上皮细胞无再生能力,细胞死亡后不被替换,而是邻近的细胞向侧面滑动,以填补死亡细胞遗留下来的空间。视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间,是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。视网膜色素上皮参与循环,吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性,并分泌多种生长因子,帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。

5.方法简介:

()实验室分离的小鼠视网膜色素上皮细胞采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

()实验室分离的小鼠视网膜色素上皮细胞PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

包被条件鼠尾胶原2-5μg/cm2

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产品货号CM-M116

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态上皮细胞样

传代特性可传1-2

消化液0.25%

培养条件气相:空气,95%CO25%

使用方法:

收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;

4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

 

培养操作:

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
图片13.jpg

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

48 T 唾液酸测试盒(带SA标准) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存 0.156-10 ng/mL 释放激素受体(GnRHR)ELISA试剂盒

100mL MES Buffer,0.5M,pH9.0  MES Buffer,0.5M,pH9.0  常温保存 0.78-50 ng/mL 人神经调节肽K受体(NKR)ELISA试剂盒

100次 鸟类种属鉴定PCR Mix(线粒体CO1基因) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保

小鼠视网膜色素上皮细胞Igj  免疫球蛋白j链抗体 规格: 0.2ml

Bestrophin 3  卵黄状黄斑蛋白3抗体 规格: 0.2ml

GFP  绿色荧光蛋白抗体 规格: 0.2ml

KCTD5  钾离子通道四聚体结构域蛋白5抗体 规格: 0.2mlStanniocalcin 1  斯钙素抗体 规格: 0.1ml

MARVELD1  候选瘤抑制基因MARVELD1抗体 规格: 0.2ml

phospho-IKK beta(Tyr199)  磷酸化KB抑制蛋白激β抗体 规格: 0.1ml

phospho-Tau protein(Thr212)  磷酸化微管相关蛋白抗体 规格: 0.1ml

phospho-TERT(Ser1125)  磷酸化端粒逆转录抗体 规格: 0.1ml

Layilin  透明质酸受体抗体 规格: 0.1ml

phospho-VEGF receptor 2(Tyr1214)  磷酸化管内皮生因子受体2抗体 规格: 0.1mlPMCA1  细胞膜钙ATP1抗体 规格: 0.2ml

3g  蛋白去除试剂S Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

2 ug pESC-HIS pESC-HIS 低温运输,-20℃保存

 


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