保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*的微生物保存法。
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产品名称 | 用途 | 货号 |
红曲霉 | 仅供科研 | GOY-01J6584 |
菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Boc-Lys(Boc)-ONp 97%甲磺隆标准溶液 100μg/ml,u=2%,溶剂:酮Biotin/HRP 辣根过氧化物标记
Boc-Lys(Z)-OSu 98%甲磺隆标准溶液 10μg/ml,u=4% Avidin/HRP 辣根过氧化物标记亲合素
N-(叔丁氧羰基)-D-赖 98%四聚乙 分析标准品,97%Goat Anti-human C3/HRP 辣根过氧化物标记羊抗人补体C3
N-[(9H-芴-9-甲氧基)羰基]-N'-[(2-烯氧基)羰基]-L-赖 95%异甲草 分析标准品,98.5%Goat Anti-human IgA/HRP 辣根过氧化物标记羊抗人IgA
N-芴甲氧羰基-N'-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代环己基亚甲基)-3-甲甲霜灵 分析标准品,98%Goat Anti-human IgG/HRP 辣根过氧化物标记羊抗人IgG
Z-丁氧羰基赖 98%甲霜灵标准溶液 100μg/ml,u=5% Goat Anti-human IgM/HRP 辣根过氧化物标记羊抗人IgM
H-Leu-2-Chlorotrityl Resin 0.3~0.8 mmol/g, 100~200 mesh甲霜灵标准溶液 10μg/ml,u=6% Goat Anti-mouse IgG/HRP 辣根过氧化物标记羊抗小鼠IgG
H-Lys(Boc)-2-Chlorotrityl Resin 0.3~0.8 mmol/g, 100~200 mesh甲氧虫酰肼 分析标准品,98%Goat Anti-mouse IgM/HRP 辣根过氧化物标记羊抗小鼠IgM
红曲霉硫线标准溶液 10ng/uL(10mg/L)TrxR(Mouse thioredoxin reductase) ELISA Kit 小鼠硫氧还蛋白还原豚鼠铁蛋白(FE)联免疫吸附测定试剂盒
硫线 分析标准品,92%Trx(Mouse thioredoxin) ELISA Kit 小鼠硫氧化还原蛋白豚鼠增殖核抗原(PCNA)联免疫吸附测定试剂盒
3--1,2-标准溶液 1000μg/g,体:乙乙酯Collagenase II(Mouse Collagenase Type II) ELISA Kit 小鼠胶原II豚鼠衰老关键蛋白4(FBLN4)联免疫吸附测定试剂盒
铷锶年龄标准物质(长石) 体:长石Collagenase I(Mouse Collagenase Type I) ELISA Kit 小鼠胶原I豚鼠脂球因子8 (MFG-E8)联免疫吸附测定试剂盒
小牛胸腺DNA含量标准物质 小牛胸腺DNA:1006 mg/kgP-PKC(Mouse phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 小鼠化蛋白激C豚鼠性激素结合球蛋白(SHBG)联免疫吸附测定试剂盒
胆固纯度标准物质 99.7%pERK(Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 小鼠化外信号调节激豚鼠血栓前体蛋白(TpP)联免疫吸附测定试剂盒
血标准物质 分析标准品CCB(Mouse calcium channel blockers) ELISA Kit 小鼠钙通道阻滞剂豚鼠脱氢B(LDHB)联免疫吸附测定试剂盒
碳钙纯度标准物质 99.97%ALT/GPT(Mouse Alanine Aminotransferase) ELISA Kit 小鼠氨转氨/谷转氨豚鼠状旁样蛋白(PLP)联免疫吸附测定试剂盒
中卤代烃混合标准溶液 体:BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白豚鼠热休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)联免疫吸附测定试剂盒
四化碳标准溶液 0.3mg/L,体:RBP-4(Mouse Retinol-binding protein 4) ELISA Kit 小鼠视黄结合蛋白4豚鼠烟酰腺嘌呤二核苷氧化1(NOX1)联免疫吸附测定试剂盒
四化碳标准溶液 0.6mg/L,体:6-keto-PGF1a(Mouse 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a豚鼠八聚体结合转录因子1(OBTF1)联免疫吸附测定试剂盒
盐克仑特罗标准溶液 1.01mg/ml,溶剂:Pentosidine(Mouse Pentosidine) ELISA Kit 小鼠戊糖素豚鼠蛋白酪氨受体N(PTPRN)联免疫吸附测定试剂盒
中那林标准溶液 1.05mg/mlAGEs(Mouse advanced glycation end products) ELISA Kit 小鼠晚期糖化终末产物豚鼠外质糖蛋白(MEPE)联免疫吸附测定试剂盒
2,4-二酚标准溶液1.00mg/ml,溶剂:NGAL(Mouse neutrophil gelatinase-associated lipocalin) ELISA Kit 小鼠中性粒明胶相关脂质运载蛋白豚鼠活化Ⅻ(FⅫa)联免疫吸附测定试剂盒
2,4-二氧乙标准溶液 1000mg/L,体:Hp-IgG(Mouse Helicobacter pylori IgG) ELISA Kit 小鼠幽门螺旋菌IgG豚鼠碱性(ALP)联免疫吸附测定试剂盒