【运输及保存】
产品仅用于科研低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
【自备试剂】
一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
【使用方法】
一、样品 RNA 的制备
用自选方法纯化 EMCV 样品的 RNA ,也可以另购本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述两款产品跟本试剂盒兼容。
二、阳性对照
为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA 段作为阳性对照。使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分 在专门的区域操作。
产品名称 | |
规格 | 50次 |
货号 | BJP6980 |
订购流程:
通过在线客服咨询产品→确定产品→提供单位收货信息→确立合同→安排发货。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.产品仅用于科研所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
【参考值(参考范围)】
1.试剂盒有效性判定:
(1)阳性对照:有典型S型扩增曲线或Ct值≤35。
(2)阴性对照:Ct值>38或无Ct值,线形为直线或轻微斜线,无指数增长期。
2.标本结果判定:
(1)阳性:标本检测结果Ct值≤35或有明显指数增长期。
(2)可疑:标本检测结果Ct值在35~38范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果Ct值仍在35~38范围内,有明显指数增长期,则判定为阳性,否则为阴性。
(3)阴性:标本检测结果Ct值>38或无Ct值。
Phospho-cdc2 (Thr161) 英文名称: 磷酸化周期素依赖激酶2抗体 0.1ml
Anti-BOb-1 B细胞特异性转录因子抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
IL-6 人白介素-6Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-CGB 嗜铬粒素B抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NUP54 NUP54抗体 规格 0.2ml
BCA(bicinchoninic acid) BCA蛋白浓度测定试剂盒 60ml
TCF3 英文名称: 转录因子3抗体(螺旋环螺旋蛋白HE47) 0.2ml
AF10 英文名称: 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体 0.1ml
Anti-CBL2 /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
AcSDKP(Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit 小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-CCL17/TARC/FITC 荧光素标记胸腺活化调节趋化因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EDRF1/C10orf137 红细胞分化相关因子1抗体 规格 0.2ml
CX3CR1(Human CX3C-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CX3C趋化因子受体1 96T
phospho-MYF5 (phospho Ser49) 英文名称: 磷酸化生肌决定因子Myf5抗体 0.1ml
转基因品系玉米NK603XMON863 PCR试剂盒植物甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法活性荧光定量检测试剂盒LY6K ELISA KitC34H42O20
植物甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性定量检测试剂盒Mouse IL-12(P40)ELISA KITC30H48O4
植物碱性焦磷酸酶(Alkaline Pyrophosphatase)活性比色法法定量检测试剂盒Human C4a ELISA KitC57H104O6
植物结构域重排甲基转移酶(Domain Rearranged Methylase;DRM)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒Human anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISA KitC14H12O4
植物聚甲基半乳糖醛酸酶(Polymethylgalacturonase;PMG)活性比色法定量检测试剂盒Human EG-VEGF ELISA KitC6H13NO5
植物赖氨酸羟化酶(lysyl hydroxylase)活性比色法定量检测试剂盒MVK(Mevalonate kinase) ELISA KitC9H11NO4
植物亮氨酸氨基肽酶(leucine aminopeptidase;LAP)电泳分析试剂盒MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) ELISA KitC17H26O10
植物磷酸葡萄糖酸脱氢酶(phosphogluconate dehydrogenase;PGD)电泳分析试剂盒Anti-LAMP2(Anti-lysosomal Associated Membrane Protein 2 Antibody) ELISA KitC44H64O24