Minucells and Minutissue灌注培养系统的优点
① 支持多种组织细胞的选择。
② 排除了胞外基质材料中胶原成份对细胞分化的影响。
③ 可对新鲜组织细胞进行连续灌注培养。
④ 可进行细胞的*体外培养。
⑤ 体外灌注培养条件下可见细胞增长与增殖。
⑥ 可进行生物材料支持下的三维细胞培养。
系统介绍
Minusheet三维灌流系统设计有专门的封闭式的培养小室，联合蠕动泵，采用灌流系统进行体内模拟细胞培养，
使细胞能够聚集生长，形成组织样结构，很好的模拟体内生理状况，可以更直观的反映细胞生物学和功能，
更准确的构建靶组织模型，不仅可以培养单一细胞，而且还可以进行多种细胞的共培养。
利用3D细胞培养技术使细胞形成3D微组织，从而更好地模拟体内细胞生长情况，更直观的反映细胞生物学和功能，
更准确的构建靶组织模型。
可用于几乎任何类型细胞的3D培养，包括细胞系、原代细胞、干细胞及多种细胞共培养。应用范围涉及癌症研究及
药物分析，细胞生物学研究和组织工程，吸收、分布、新陈代谢、排泄及毒性测试（ADME-TOX)，药物代谢动力学（DMPK）。
传统的细胞培养瓶/皿依赖于培养箱提供CO2和湿度环境进行生长，而这些条件由于没有得到严格的控制，使得模拟的生
长环境*不同于严格意义上的体内环境，从而导致实验数据存在一定的偏差；且传统培养容器的操作和培养的开放性，
不能及时保持培养液的新鲜、不能保证代谢物的及时排除。容易导致细胞发生污染，而3D（三维）细胞培养克服了这些问题,
该系统自带的热板和气体交换模块，实时保证了细胞所需要的温湿度,适合细胞在保持养分不变的*培养，
显微腔室便于实时培养观察，梯度培养腔室使得培养环境更类体内环境。
系统亮点
充分的养分保障及时代谢物的排除，提高了细胞密度
连续灌注的培养基提供了充分的营养成分, 并可带走代谢产物, 同时, 细胞保留在反应器系统中,可以达到很高的细胞密度
不用CO2培养箱提供温湿度环境，该系统自带的热板和气体交换模块，实时保证了细胞所需要的温湿度
应用细胞类型广泛，几乎可以应用到任何类型细胞的3D培养。
图1. 细胞类型
3)可以联用显微镜
Chamber上下两侧都是透明的，可以联合显微镜直接观察，甚至在灌流的过程中也可以观察。
图2. Chambers类型大全
4).可以采用梯度培养，不同种类的细胞共培养。
可以采用不同的培养基对细胞进行灌冲，这样能更好的模拟体内的环境，实验更准确。
图3.梯度灌流
图4. 两种细胞的共培养
4).可以*培养
样品可以灌注培养高达数月，可以进行周期较长的实验。
应用范围
1.可消除造血细胞静态培养中存在的浓度梯度和悬浮培养时换液引起的波动,为造血细胞体外扩增提供更理想的培养环境
2.灌注培养有利于造血干(祖)细胞的进一步扩增,培养得到的细胞中干(祖)细胞含量较高,培养规模可以达到临床要求
3.使重组蛋白质的产率增加，灌注培养的方法还可以延缓细胞的衰退
4.注培养有利于体外高活性有功能的软骨组织工程的构建。灌注培养得到的DNA和糖胺聚糖的含量明显增高,比用静态培养构建的软组织工程含量多,灌注培养对于构建有功能的软组织工程是一个比较好的方法。
5.灌注培养也广泛应用于骨组织工程。灌注培养系统里碱性磷酸酶的水平和钙结合蛋白的含量比静态培养的高;和传统的培养方法相比,三维灌注培养系统里的环境更接近体内环境,更能促进间充质干细胞的成骨性分
6.由于促进细胞分化的特性,梯度灌注培养特别有助于组织工程细胞片的构建
?灌注培养可以提高培养细胞的分泌功能。可以防止因为蛋白水解酶的作用导致蛋白水解丢失,在提高细胞产率方面起到很大的作用
7.灌注的生物反应器培养细胞时,能很好地控制物理和化学因素、培养的微环境和培养条件,尤其是氧浓度和剪应力的问题。
(1).可用于几乎任何类型细胞的3D培养，包括细胞系、原代细胞、干细胞及多种细胞共
培养。
(2). 癌症研究及药物分析
(3). 细胞生物学研究和组织工程
(4). 吸收、分布、新陈代谢、排泄及毒性测试（ADME-TOX)
(5). 药物代谢动力学（DMPK
Tannic acid label indicates abnormal cell development coinciding with regeneration
of renal tubules
a) After isolation renal stem/progenitor cells (s/pC) are placed between
layers of polyester fleece (PF) to create an artificial interstitium.
The fleece layers are mounted in a Minusheet tissue carrier.
b) For culture the carrier is transferred to a perfusion container with horizontal flow characteristics.
c) Perfusion culture is performed for 13 days under atmospheric air.
During this period always fresh culture medium is transported by a peristaltic pump
(1.25 ml/h) from a storage bottle to the container and then to awaste bottle.
案例1.干细胞体外研究，此研究应用细胞3D培养系统可以模拟体内的正常情况，干细胞疗法应用于多种疾病，
但是植入的干细胞往往被体内流体伤害，改变了细胞外基质，为了研究细胞的的适应参数，更好的起到治疗的作用，
采用了体外灌流培养系统，模拟体内体内的生理环境。此研究利用细胞灌流培养技术体外研究肾小管细胞的再生机制。
（Minuth and Denk BMC Clinical Pathology 2014, 14:34）
Reconstruction of Auto-Tissue-Engineered Lamellar Cornea by Dynamic Culture for Transplantation:
A Rabbit Model
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