T25m2 大鼠皮下脂肪细胞说明

细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

大鼠皮下脂肪细胞【Rat Fat: Normal Subcutaneous Fat Cells】产品描述：提供的原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞处理方法：
以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考，具体操作还需要根据到货时细胞密度，细胞生长状态等具体情况，酌情处理，如需要更详细技术指导，请及时电话或邮件联系。
一．贴壁细胞
客户接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
显微镜观察细胞，当细胞融汇至80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
1000rpm,5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO2  培养。
二．悬浮细胞
1. 接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
3. 严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒）。
5. 1000rpm,5min离心，重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃,5%CO2  培养细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。
动物组织β-半乳糖苷酶活性超敏荧光定量检测试剂盒20 乙酸钙一水(>98%,BR)  Calcium acetate, monohydrate  质量规格：>98%,BR

动物组织β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒20 三钙(>98%,BR)  Calcium phosphate, tribasic  质量规格：>98%,BR

动物组织冰冻切片糖蛋白高酸希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIANBLUE)染色试剂盒50 DL-硒代蛋氨酸(USP)  DL-Selenomine  质量规格：>98%(HPLC),USP

动物组织超氧化物歧化酶(SOD)亚型制备试剂盒50 蜜二糖  Melibiose  质量规格：>98%,水合物

动物组织钙ATP酶(Ca++-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 草酸钠(>98%，BC)   oxalate  质量规格：>98%，BC

动物组织钙镁ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 钨酸钠二水(>98%,BR)   tungstate, dehydrate  质量规格：>98%,BR

动物组织高内质网分离试剂盒10 丁二酸酐(>98%,BR)  Succinic anhydride  质量规格：>98%,BR

动物组织高质化肌质网分离试剂盒10 吐温60  Tween-60  质量规格：BR

动物组织活性肌质网分离试剂盒10 酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)  Zymosan A from Saccharomyces cerevisiae  质量规格：>98% (HPLC),BC

动物组织活性内质网分离试剂盒10 硫酸钙(>99%,BR)  Calcium sulfate, anhydrous  质量规格：>99%,BR
动物组织氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒50 硫酸软骨素  Chondroitin sulfate  质量规格：>95%,BR

ELISAKitADR兔阿霉素规格：48T/96T 异烟酸  Isonicotinic acid  质量规格：>98%,BR

小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA试剂盒 ，英文名： BSA ELISA Kit L-苹果酸  L-Malic acid  质量规格：>98%,BR

人褪黑素(MT)ELISA检测试剂盒HumanMelatonin,MTELISAKit 96T/48T 蛋白酶K溶液(20 mg/ml)  Proteinase K Solution, 20 mg/ml  质量规格：20 mg/ml

大鼠载脂蛋白C-I(APOC1)试剂盒 Rat apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit 多聚赖氨酸0.1%溶液  Poly-L-lysine solution ( 0.1%)  质量规格：M.W:150,000~300,000

英文名称HumanE-CadherinELISAKit人E-钙粘附分子(E-Cadherin)规格：96T/48T 盐酸四环素溶液,50 mg/ml  Tetracycline  solution, 50 mg/ml, sterile  质量规格：50 mg/ml,灭菌装

动物组织总ATP酶(totalATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 D-葡糖糖-6-二钠二水  D-Glucose-6-phosphate, di, dihydrate  质量规格：>99%,BR

ELISAKitAβ1-40兔β淀粉样蛋白1-40规格：48T/96T 丁二酸钠(AR)   succinate  质量规格：AR,>99%

小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 牛血红蛋白  Hemoglobin  质量规格：BR

Rat methylase ELISA Kit (Methylase) 大鼠化酶(Methylase)ELISA试剂盒 聚乙二醇10000  PEG 10000  质量规格：分子量9,000~11,000
大鼠皮下脂肪细胞说明地生兰(terresial)移植维护培养基500毫升溶液/片剂 灵芝酸C甲酯 HPLC≥95% 20mg

地生兰(terresial)增殖培养基500毫升溶液/片剂 灵芝酸C HPLC≥98% 10mg

电击法酵母细胞转化试剂盒20 灵芝酸C HPLC≥95% 20mg

电击法细胞融合试剂盒10 灵芝酸C HPLC≥95% 20mg

电镜检测化学固着溶液10毫升 灵芝酸C HPLC≥95% 20mg

电镜样品固着液(2%Formalin固着液)50毫升 灵芝酸B HPLC≥98% 20mg

电镜组织三固着液(2,4,6-imethylpyridinepuriss)50毫升 灵芝酸B HPLC≥97% 20mg

电转感受态细菌制备试剂盒1 灵芝酸AM HPLC≥98% 20mg

电转印DNA南方杂交试剂盒5 灵芝酸A(标准品)  Ganoderic acid A  质量规格：HPLC≥95%，标准品

吊钟海棠*培养基500毫升溶液/片剂 灵芝酸A HPLC≥98% 20mg
我公司提供原代细胞、细胞系、细胞株和菌种，细胞库管理规范，提供的细胞株背景清楚，提供参考文献和*培养条件。纯度可达 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。