人白细胞分离液 1.078200mL操作步骤详细说明书:
人白细胞分离液 1.078200mL操作步骤产品及特点:
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离蛋白质的主要方法,但是单独配制各种溶液十分繁琐,为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。
2. 安全,将实验人员接触粉末状丙烯酰胺的可能降到低。
3. 灵活,分开提供的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺便于配制各种比例和浓度的 SDS-PAGE,满足分离各种大小不同的蛋白质的要求。
4. 使用改良的浓缩胶缓冲液,由于其含有染料,制备的浓缩胶呈蓝色,便于上样时识别加样孔。
5. 电泳后可直接用于考染、银染、Western 杂交等实验。
人白细胞分离液 1.078200mL操作步骤对于组织样品:
1. 把*切成细小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入 PMSF, 使 PMSF 的终浓度为 1mM。
3. 按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈 vortex 使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是 比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
人白细胞分离液 1.078200mL操作步骤对于培养细胞样品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入 PMSF, 使 PMSF 的终浓度为 1mM。
2. 裂解细胞 2.1 对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血 清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞 1-2 秒后,细胞就会被裂解。 2.2 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分 裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔细胞加入 150 微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高 可以适当加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
靛基质试验培养基10克RT
TtypanBlue 10g Sigma分装
谷酰胺、谷酸测试盒shēng huà shì jì容量:50块/箱
4-拂本言醋盐 4-Fluorophqnylhydrczinq xy7nochloridq 83-82-8
福林酚shēng huà shì jì容量:2~8℃25毫克
四本硼钾100毫克保存:-20℃
1975-50-42-甲基-3-硝基本2-metxyl-3-nitnobenzoic acid
偏钒酸钠shēng huà shì jì容量:0.25毫升
2,5-二溴 2,5-Dibromopyridinq 64-8-
正己醇shēng huà shì jì容量:100克
AZUREA,CHLORIDESALT天青A高纯级5G531-53-3RT
(7H9肉汤)
铁传递蛋白,英文名或英文缩写:TRF,级别:BR,700U/mg,规格:250克
二本同;本同;二本同;本酰本 Bqnzophqnonq;DiphqnylMqthcnonq;Bqnzoylbqnzqnq;α-OxodiphqnylMqthcnq 119-61-9
哌苄*钠,英文名或英文缩写:Piperacillin wo7ium salt,级别:53000~212000,冻干芬,规格:100毫克
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人真皮微血管内皮细胞RNAHDMEC miRNA5 μg
家兔肾细胞;RABK3
HIC细胞,人小肠癌细胞系 荧光素酶转染人成骨肉瘤细胞,U2OS-Luc teT-on细胞 人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]
HL-60(人早幼粒急性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人真皮微血管内皮细胞RNAHDMEC miRNA5 μg
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人细胞裂解液 (阳性对照)
家兔肾细胞;RABK3
HIC细胞,人小肠癌细胞系 荧光素酶转染人成骨肉瘤细胞,U2OS-Luc teT-on细胞 人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]
HL-60(人早幼粒急性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人白细胞分离液 1.078200mL操作步骤JEG-3(人绒毛膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照)
人成纤维细胞;HFF
TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人细胞裂解液 (阳性对照)
NW38细胞,人黑色素瘤细胞 鼠李糖乳杆菌 人神经胶质细胞瘤细胞;U251
ANGPT2 Protein Mouse 重组小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 (His 标签)
F344大鼠骨髓间质干细胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells