购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研
产品名称 | TG1 电击感受态细胞 50ul*20 |
包装 | 50ul*20 |
分类 | 克隆感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
M-CSF 人巨噬细胞集落刺激因子 规格: 48T/96T
MAF 人巨噬细胞活化因子 规格: 48T/96T
MSP 人巨噬细胞刺激蛋白 规格: 48T/96T
Arg 人*酶 规格: 48T/96T
AVP 人*加压素 规格: 48T/96T
MT 人金属硫蛋白 规格: 48T/96T
SE 人金葡菌肠毒素 规格: 48T/96T
ADAM8 人解整合素样金属蛋白酶8 规格: 48T/96T
UU-Ab 人解脲脲原体抗体 规格: 48T/96T
CNTF 人睫状神经营养因子 规格: 48T/96T
TB-Ab IgG 人结核菌杆抗体IgG 规格: 48T/96T
TG1 电击感受态细胞 50ul*20 Hpt/HP 人结合珠蛋白/触珠蛋白
特戊酸氯甲酯 18997-19-8
1-甲基吲哚-3-甲醛 19012-03-4
2,6-二氟硝基苯 19064-24-5
叔丁醇锂 1907-33-1
2-氯-5-碘苯甲酸 19094-56-5
1-Cbz-4-哌啶酮 19099-93-5
喹啉-3-硼酸 191162-39-7
4-溴-2-(三氟甲基)苯甲腈 191165-13-6
1-苄基-4-哌啶酮(冷库) 19125-34-9
偶氮氯磷 1914-99-4
4-甲苯磺酰氰 19158-51-1
劳森试剂 19172-47-5
3,5-二甲氧基苯硼酸 192182-54-0
3-氯-4-氟溴苄 192702-01-5
DL-高* 1927-25-9
规格: 48T/96T
CTGF 人结缔组织生长因子 规格: 48T/96T
CTAPⅢ 人结缔组织活化肽Ⅲ 规格: 48T/96T
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。