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购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研
| 产品名称 | DH10B 电击感受态细胞 50ul*20 |
| 包装 | 50ul*20 |
| 分类 | 克隆感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
-10/CXCL10 人干扰素诱导蛋白10 规格： 48T/96T
IRF 人干扰素调节因子 规格： 48T/96T
CNR-1 人钙粘蛋白相关的神经受体1 规格： 48T/96T
CRT 人钙网蛋白 规格： 48T/96T
calnexin 人钙联蛋白 规格： 48T/96T
VGCC 人钙离子通道抗体 规格： 48T/96T
CR 人钙结合蛋白 规格： 48T/96T
CAM 人钙调素 规格： 48T/96T
CaN 人钙调磷酸酶 规格： 48T/96T
CaN 人钙调磷酸酶 规格： 48T/96T
CALD 人钙调结合蛋白 规格： 48T/96T
CALD 人钙调结合蛋白 规格： 48T/96T
histatin 5 人富组蛋白 规格： 48T/96T
PNP 人副肿瘤性天疱疮抗体 规格： 48T/96T
RPA-70 人复制蛋白A 规格： 48T/96T
CPSA 人复合前列腺特异性抗原 规格： 48T/96T
BA 人封闭抗体 规格： 48T/96T
SLPI 人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子 规格： 48T/96T
SIgA 人分泌型免疫球蛋白A 规格： 48T/96T
MP-Ab 人肺炎支原体抗体 规格： 48T/96T
Cpn-Ab 人肺炎衣原体抗体 规格： 48T/96T
PARC/CCL18 人肺部活化调节趋化因子 规格： 48T/96T
SP-D 人肺表面活性物质相关蛋白D 规格：
1-甲基-4-哌啶甲酸甲酯 1690-75-1
DH10B 电击感受态细胞 50ul*202-羟基异* 169253-31-0
BOC-D-* 16937-99-8
硼钠 16940-66-2
六氟磷酸 16940-81-1
六氟磷酸铵 16941-11-0
乙酰乙酸叔丁酯 1694-31-1
(S)-1-N-Boc-2-甲基甲酸 169447-70-5
BOC-N-甲基-L-* 16948-16-6
48T/96T
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
