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| 产品名称 | *0 感受态细胞 100ul*20 |
| 包装 | 100ul*20 |
| 分类 | 克隆感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
sE-selectin 小鼠可溶性E选择素 规格： 48T/96T
ENG/sCD105 小鼠可溶性Endoglin 规格： 48T/96T
Gzms-B 小鼠颗粒酶B 规格： 48T/96T
Gzms-A 小鼠颗粒酶A 规格： 48T/96T
EMAb 小鼠抗子宫内膜抗体 规格： 48T/96T
pANCA 小鼠抗中性粒细胞核周抗体 规格： 48T/96T
ACA 小鼠抗中性粒/中心体抗体 规格： 48T/96T
PCNA 小鼠抗增殖细胞核抗原抗体 规格： 48T/96T
AT 小鼠抗* 规格： 48T/96T
PA-IgG/M/A 小鼠抗血小板抗体IgG/M/A 规格： 48T/96T
ACA-IgM 小鼠抗心磷脂抗体IgM 规格： 48T/96T
ACA-IgG 小鼠抗心磷脂抗体IgG 规格： 48T/96T
ACA-IgA 小鼠抗心磷脂抗体IgA 规格： 48T/96T
AMA 小鼠抗心肌抗体 规格： 48T/96T
dsDNA 小鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体 规格： 48T/96T
dsDNA 小鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体 规格： 48T/96T
ASMA 小鼠抗平滑肌抗体 规格： 48T/96T
ATR 小鼠抗*受体 规格： 48T/96T
AT-Ⅲ 小鼠抗*Ⅲ抗体 规格： 48T/96T
AECA 小鼠抗内皮细胞抗体 规格： 48T/96T
ADH/AVP 小鼠抗利尿激素/*加压素 规格： 48
2-甲基-3-溴吡啶 38749-79-0
4-溴-2-氯苯胺 38762-41-3
丁二酸单甲酯(琥珀酸单甲酯) 3878-55-5
R(+)-alpha-甲基苄胺 3886-69-9
甲氧基乙酰氯 38870-89-2
N-羟乙基酞酰亚胺 3891-7-4
四丁基三* 38932-80-8
3-溴-5-乙酰基吡啶 38940-62-4
2-噻吩乙酰氯 39098-97-0
3-氯-N-甲基苄胺 39191-07-6
1H-吡唑-3-甲醛 3920-50-1
左旋樟脑-10-磺酰氯 39262-22-1
2-氨基-5-溴苯甲腈 39263-32-6
氯钠 3926-62-3
*0 感受态细胞 100ul*20邻溴三氟甲苯 392-83-6
3-三氟甲基-4-溴苯胺 393-36-2
5-溴-2-氟三氟甲苯 393-37-3
2-氨基-5-氟三氟甲苯 393-39-5
2,4-二氯嘧啶 3934-20-1
2,5,6-三溴-3-甲基吡啶 393516-82-0
邻氟苯甲酰氯 393-52-2
Boc-L-*甲酯 4326-36-7
2-三氟甲基苯甲酸 433-97-6
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
