EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0901图片培养温馨提示:
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细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0901图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一Y染色体微缺失男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代;5-6天一次
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0901图片细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
IL17RC Others Human 人 IL17RC 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0079ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠小肠平滑肌细胞*培养基 100mL
CNE人鼻咽癌细胞 Human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE 1640+10%FBS
CNTF Protein Human 重组人 CNTF 蛋白 (His 标签)
SF126(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 RD(恶性胚胎横纹肌瘤)
K562/Adr 人白血病*耐药株
CL-0107HGC-27(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×2
12. 骨骼细胞系统
小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albino 大鼠角膜上皮细胞*培养基 100mL
豹猫肺成纤维样细胞;LCL4
IL10 Others Human 人 IL10 / Interleukin-10 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0079ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2
IL17RC Others Human 人 IL17RC 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠小肠平滑肌细胞*培养基 100mL
CNE人鼻咽癌细胞 Human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE 1640+10%FBS
CNTF Protein Human 重组人 CNTF 蛋白 (His 标签)
SF126(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 RD(恶性胚胎横纹肌瘤)
Anti-P2Y1 receptor/FITC 荧光素标记P2Y1受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Streptavidin/HRP 辣根过氧化物酶标记链霉亲和素Multi-class antibodies规格: 0.1ml
*激酶2抗体 Anti-CK2 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗小鼠IgG 0.1ml
Phospho-FLT3 (Tyr589 + Tyr591) 英文名称: 磷酸化FMS样酪酸激酶3 0.1ml
Rhesus antibody Rh PIWIL1/Miwi piwi样1蛋白抗体 规格 0.1ml
Streptavidin/HRP 辣根过氧化物酶标记链霉亲和素Multi-class antibodies规格: 0.1ml
GRM2/GLUR2 (Glutamate Receptor Metabotropic 2) 促代谢型*受体2抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
RHOA RhoA 兔单抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-Crkl (Tyr207) 磷酸化接头蛋白CrkL抗体 规格 0.1ml
BCA蛋白浓度测定试剂盒 200次 自产
ZBTB3 英文名称: 锌指蛋白ZBTB3抗体 0.2ml
DCTN1 英文名称: 动力蛋白激活蛋白1抗体 0.1ml
RHOA RhoA 兔单抗 (FITC) Human
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0901图片SRRM3 英文名称: 丝酸/精酸相关核基质蛋白3抗体 0.2ml
ENT2 英文名称: 核苷转运蛋白ENT2抗体 0.2ml
ATP结合蛋白家族6抗体 Anti-ABCB6 0.1ml
Anti-WNT10A/FITC 荧光素标记信号通路WNT10A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO1 (Ser256) 磷酸化叉头蛋白家族1抗体 规格 0.1ml
Collagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0901图片质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。