双位点HC-kit受体细胞株;DMF7培养培养温馨提示:
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细胞名称 双位点HC-kit受体细胞株;DMF7培养
形态特性 圆形
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞株由陈松森教授实验室建立;双位点Cys151和Cys183突变的c-Kit基因转染293ET细胞,筛选获得。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;IL-3 or rhGM-CSF
传代方法 1:3传代;3~4天1次。
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
双位点HC-kit受体细胞株;DMF7培养细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0162MS1(小鼠胰岛内皮细胞)5×106cells/瓶×2
人心肌细胞-裂解物HCM-a L
家猪皮肤细胞;SSC-S1 癌细胞,ZR-75-1细胞 NS1细胞,小鼠骨髓瘤细胞
腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓 Mouse
CM-R016大鼠胰腺星状细胞*培养基100mL
人肝间充质干细胞(肝)(HMSC-HE)(5×105)
绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞;MFC-GFP 小鼠小肠隐窝上皮细胞*培养基 100mL
人上皮细胞;Ca Ski
P4HB Others Mouse 小鼠 P4HB / ERBA2L 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0162MS1(小鼠胰岛内皮细胞)5×106cells/瓶×2
F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO细胞裂解液 (阳性对照)
人心肌细胞-裂解物HCM-a L
家猪皮肤细胞;SSC-S1 癌细胞,ZR-75-1细胞 NS1细胞,小鼠骨髓瘤细胞
腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
Anti-P38 MAPK/RBITC 红色荧光素罗丹明(RBITC)标记原活化蛋白激酶p38抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
rec Protein G/HRP 辣根过氧化物酶标记的重组蛋白GMulti-class antibodies规格: 0.1ml
肝细胞生长因子受体抗体 Anti-C-Met/HGFR 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗猴IgG 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321) 英文名称: 磷酸化叉头蛋白3A抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh PILR beta 细胞表面受体PILRβ抗体 规格 0.2ml
rec Protein G/HRP 辣根过氧化物酶标记的重组蛋白GMulti-class antibodies规格: 0.1ml
HPV18 E6 人类状瘤病毒18抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-ABCB6 ATP结合蛋白家族6抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CHK2 (Thr68) 磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体 规格 0.1ml
兔抗豚鼠IgG血清 0.5ml 国产
WNT7A 英文名称: 原癌基因wnt7a蛋白抗体 0.1ml
Phospho-DOK2 (Tyr142) 英文名称: 磷酸化D酪酸激酶衰减蛋白2抗体 0.1ml
Anti-ABCB6 ATP结合蛋白家族6抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
双位点HC-kit受体细胞株;DMF7培养phospho-SHC (Tyr427) 英文名称: 磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体 0.1ml
EBNA 3B 英文名称: EB病毒核抗原-3B抗体 0.2ml
CD40L抗体 Anti-CD40L 0.1ml
Mouse Anti-human VEGF/FITC 荧光素标记小鼠抗人VEGF单克隆抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鸟苷酸调节蛋白12抗体 规格 0.1ml
Cdc34 peptide 细胞周期调控因子34抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
双位点HC-kit受体细胞株;DMF7培养质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。