我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，货期短，价格优，售后齐全。
产品名称 | |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X96562 |
商品属性：
名称 WI-38 (胚肺细胞) 别称Wi-38; WI 38; WI38; Wistar Institute-38; AG06814-J; AG06814-M; AG06814-N 种属人类 年龄（性别）3个月妊娠期胎儿 组织来源正常肺 生长特性贴壁细胞 细胞形态成纤维细胞样 背景描述WI-38是来自妊娠3个月的正常胚胎肺组织。WI-38细胞是首株用于人类疫苗制备的系，培养液中添加TNF-α可以促进WI-38细胞生长。 生物安全等级1 生长培养基MEM＋10% FBS＋1% P/S 推荐传代比例1:2-1:4 推荐换液频率2~3次/周 倍增时间~24小时 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ 注意事项该细胞为有限传代细胞系，请注意代次控制。 |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人 CLEC4F 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 BMP15 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 HFE 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 RAET1G 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 CLEC12A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 BTLA 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 CLEC3A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 NEUROG3 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 IFNL3 基因全
WI-38 (胚肺细胞) 5g 乙二醇双 (2- 氨基乙基 ) 四乙酸 (EGTA) EGTA 室温保存 15.6-1000 pmol/L B12(Vitamin B12)ELISA试剂盒
氯化血红素 hemin 1g改良沙氏琼脂培养基进口、国产Sabouraud′s Agar，Modified250克真菌检测
亚硫酸铁琼脂 250g 0.625-40 ng/mL 人Gremlin 1(GREM1)ELISA试剂盒
0.1mL×10 JM109化学感受态 JM109 Competent Cell -80℃保存 0.625-40 ng/ml 猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒
50次 柱式水样DNAout Column Water DNAOUT 常温 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Sphingosine
100次 海肾荧光素报告基因检测试剂盒 Renilla Luciferase Assay Kit -20℃或-80℃避光保存肉肝胃消化干粉培养基进口、国产肉肝胃消化干粉培养基1万毫升/袋猪丹毒、牛副伤寒疫苗生产
50T 乙型肝炎病毒基因分型PCR测定试剂盒 低温运输，-20℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 5 chain
250mL Alkaline Running Buffer（碱变性胶电泳液） Alkaline Running Buffer 常温保存
250mL Phosphate Buffer，0.5M, pH7.0 Phosphate Buffer，0.5M, pH7.0 常温保存 78-5000 pg/mL 人桥粒芯糖蛋白3(DSG3)ELISA试剂盒ELISA试剂盒
250mL HEPES Buffer,1M,pH9.0 HEPES Buffer,1M,pH9.0 常温保存MS培养基进口、国产MS Medium250克用于植物组织培养的基础培养基
30次 一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装 One-Stop miRNA Urea-PAGE Pack 4℃保存
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
